| In vitro Differentiation of Human iPSC-derived Cardiovascular Progenitor Cells (iPSC-CVPCs)
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Author:
Date:
2020-09-20
[Abstract] Induced pluripotent stem cell derived cardiovascular progenitor cells (iPSC-CVPCs) provide an unprecedented platform for examining the molecular underpinnings of cardiac development and disease etiology, but also have great potential to play pivotal roles in the future of regenerative medicine and pharmacogenomic studies. Biobanks like iPSCORE ( Stacey et al., 2013; Panopoulos et al., 2017), which contain iPSCs generated from hundreds of genetically and ethnically diverse individuals, are an invaluable resource for conducting these studies. Here, we present an optimized, cost-effective and highly standardized protocol for large-scale derivation of human iPSC-CVPCs using small molecules and purification using metabolic selection. We have successfully applied this protocol ...
[摘要] [摘要 ] 诱导性多能干细胞衍生的心血管祖细胞（iPSC-CVPCs）为检查心脏发育和疾病病因的分子基础提供了前所未有的平台，但在再生医学和药物基因组学的未来中也具有重要作用。像iPSCORE这样的生物库（Stacey 等，2013 ；Panopoulos 等，2017）， 其中包含由数百个遗传和种族不同的个体产生的iPSC，是进行这些研究的宝贵资源。在这里，我们为小分子大规模衍生人iPSC-CVPCs和代谢选择纯化提供了一种优化，具有成本效益和高度标准化的方案。我们已经成功地应用了该协议，从154种不同的iPSCORE iPSC品系中获得了iPSC-CVPC，从而获得了大量的高纯度心脏细胞。一个重要的我们的协议的组成部分是Ç ELL Ç onfluency 估计S（ccEstimate ），用于估计当iPSC集单层将达到80％汇合，这是用于发起的iPSC-CVPC推导最佳的时间的自动方法，并且使得协议为易于在具有不同增长率的iPSC系列中使用。此外，我们发现跨iPSC-CVPC的细胞异质性是由于两种截然不同的心脏细胞类型（心肌细胞（CMs）和心外膜衍生细胞（EPDCs））的比例不同导致的，这两种细胞在心脏再生中均具有关键作用。该协议消除了iPSC线到线优化的需要，并且可以轻松地进行调整和扩展，以进行高通量研究或生成大量适用于再生医学应用的细胞。
[背景 ] ...
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| Isolation and Culturing of Rat Primary Embryonic Basal Forebrain Cholinergic Neurons (BFCNs)
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Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract] The basal forebrain is located close to the medial and ventral surfaces of the cerebral hemispheres that develop from the sub-pallium. It regulates multiple processes including attention, learning, memory and sleep. Dysfunction and degeneration of basal forebrain cholinergic neurons (BFCNs) are believed to be involved in many disorders of the brain such as Alzheimer’s disease (AD), schizophrenia, sleep disorders and drug abuse (Mobley et al., 1986). Primary cultures of BFCNs will provide an important tool for studying the mechanism of these diseases. This protocol provides a detailed description of experimental procedures in establishing in vitro primary culture of rat embryonic BFCNs.
[摘要] 基底前脑靠近从小脑发育的大脑半球的内侧和腹侧表面。 它调节多个过程，包括注意力，学习，记忆和睡眠。 据信基础前脑胆碱能神经元（BFCNs）的功能障碍和退化参与许多脑部疾病，如阿尔茨海默病（AD），精神分裂症，睡眠障碍和药物滥用（Mobley等人，1986年）。 BFCN的主要文化将为研究这些疾病的机制提供重要的工具。 该方案提供了建立大鼠胚胎BFCN的体外原代培养的实验程序的详细描述。
【背景】基础前脑胆碱能系统支配大脑皮层和海马体。 BFCN的正常功能对于正常的睡眠，学习和记忆是非常重要的。 BFCN的萎缩被认为是阿尔茨海默病的早期事件。 因此，主要的BFCNs培养将是AD研究的理想细胞模型。 在以前的研究中，很少使用初级BFCN培养物。 在这里，我们提出了一种从胚胎大鼠隔膜中分离和培养BFCNs的可靠方法，该方法简单，比以前的方法耗时少（Schnitzler等人，2008）。 我们的方法将大大方便研究BFCN功能和细胞生物学的许多关键方面。
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