| Analysis of Metals in Whole Cells, Thylakoids and Photosynthetic Protein Complexes in Synechocystis sp. PCC6803
|
|
Author:
Date:
2018-06-20
[Abstract] Metals are essential in many biological processes, including oxygenic photosynthesis. Here we described a method to measure the metal pool in whole cells and thylakoids, including the bioactive pool in intact photosynthetic protein complexes in the model oxygenic cyanobacterium Synechocystis PCC6803. In the first part of the protocol, whole cells and thylakoid membranes are carefully prepared, in which the total metal concentrations are measured by inductively coupled plasma triple-quadrupole mass spectrometry (ICP-QQQ-MS). In the second part of the protocol, isolated thylakoids are solubilized to release the integral membrane proteins and the metal binding protein complexes. These intact photosynthetic protein complexes are subjected to size exclusion chromatography (SEC) and ...
[摘要] 金属在许多生物过程中是必不可少的，包括含氧光合作用。 在这里我们描述了测量全细胞和类囊体中金属库的方法，包括模型含氧蓝藻PCH6803中完整光合蛋白复合体中的生物活性库。 在方案的第一部分中，仔细制备全细胞和类囊体膜，其中通过电感耦合等离子体三重四极杆质谱（ICP-MS / MS）测量总金属浓度。 在该方案的第二部分，分离的类囊体被溶解以释放完整的膜蛋白和金属结合蛋白复合物。 将这些完整的光合蛋白复合物进行尺寸排阻色谱（SEC），并通过ICP-MS / MS进行连接分析尺寸分离的复合物中的金属结合。
【背景】氧光合作用的过程需要金属，因为它们在光合电子传递链中作为辅因子和催化剂的基本功能。光合装置需要Fe-S簇，血红素桥Fe和非血红素Fe形式的铁（Fe），可溶性移动电子载体蛋白质质体蓝素中的铜（Cu），叶绿素中的镁（Mg）， ...
|
|
|
| Quantification of Chlorophyll as a Proxy for Biofilm Formation in the Cyanobacterium Synechococcus elongatus
|
|
Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract] A self-suppression mechanism of biofilm development in the cyanobacterium Synechococcus elongatus PCC 7942 was recently reported. These studies required quantification of biofilms formed by mutants impaired in the biofilm-inhibitory process. Here we describe in detail the use of chlorophyll measurements as a proxy for biomass accumulation in sessile and planktonic cells of biofilm-forming strains. These measurements allow quantification of the total biomass as estimated by chlorophyll level and representation of the extent of biofilm formation by depicting the relative fraction of chlorophyll in planktonic cells.
[摘要] 最近报道了蓝细菌聚球蓝细菌PCC 7942中生物膜发育的自我抑制机制。 这些研究需要定量由生物膜抑制过程中受损的突变体形成的生物膜。 在这里，我们详细描述了叶绿素测量作为生物膜形成菌株无菌和浮游细胞中生物量积累的代用途。 这些测量可以通过叶绿素水平估计的总生物量进行定量，并通过描绘浮游细胞中叶绿素的相对分数来表示生物膜形成的程度。
【背景】几个最近发表的研究表明，蓝藻中细胞聚集和生物膜发育的基础的机制的新兴兴趣（Fisher等人，2013; Jittawuttipoka等人，2013; 2014; Enomoto等人，2014; Schwarzkopf等人，2014; Enomoto等人，，2015; Oliveira等人，2015; Agostoni等人，2016; Parnasa等人，2016）。我们最近报道了一种自生物膜抑制机制，其决定了单细胞蓝细菌聚球蓝细菌PCC 7942（Schatz等人，2013; Nagar和Schwarz，2015）的浮游生长）。通过灭活特定基因来消除生物膜抑制过程导致在这种其他浮游菌株（Schatz等人，2013; ...
|
|
|