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Date:
2017-07-05
[Abstract] Organisms store carbohydrates in several forms. In yeast, carbohydrates are stored in glycogen (a multi-branched polysaccharide) and in trehalose (a disaccharide). As in other organisms, the amount of stored carbohydrate varies dramatically with physiological state, and accordingly, an assay of stored carbohydrate can help reveal physiological state. Here, we describe relatively easy and streamlined assays for glycogen and trehalose in yeast that can be applied either to a few samples, or in a moderately high-throughput fashion (dozens to hundreds of samples).
[摘要] 生物体以多种形式储存碳水化合物。 在酵母中，碳水化合物储存在糖原（多支链多糖）和海藻糖（二糖）中。 如在其他生物体中，存储的碳水化合物的量与生理状态显着变化，因此，存储的碳水化合物的测定可以帮助揭示生理状态。 在这里，我们描述了酵母中糖原和海藻糖的相对容易和流线型的测定法，其可以应用于少量样品，或以适度高通量的方式（几十至几百个样品）。
【背景】糖原和海藻糖是酵母和许多其他生物的两种储存碳水化合物。在酵母中，当培养基开始耗尽并且细胞生长速率降低时，这两种储存碳水化合物都会积累。测定酵母中存储碳水化合物的方法可追溯到至少1956年（Trevelyan和Harrison，1956a和1956b），并且自（例如，Becker，1978; Quain，1981; Schulze ，1995; Parrou和Francois，1997; Plata等人，2013）等）。测定这两种储存碳水化合物有三个基本步骤：首先，裂解或渗透细胞;第二，从糖原或海藻糖释放葡萄糖;第三，测定所得葡萄糖。
细胞可以机械裂解（Schulze等人，1995），但这不可避免地有点乏味和耗时，并且往往需要更多的细胞。细胞可以被碱渗透，但是糖原形成大的多支化颗粒，并且难以提取，因此一些方案既使用碱和酸提取（Trevelyan和Harrison，1956a和1956b; ...
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