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Catalog#: 719520
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Using xCELLigence RTCA Instrument to Measure Cell Adhesion
Author:
Date:
2017-12-20
[Abstract]  Cell adhesion to neighbouring cells and to the underlying extracellular matrix (ECM) is a fundamental requirement for the existence of multicellular organisms. As such, the formation, stability and dissociation of cell adhesions are subject to tight control in space and time and perturbations within the sophisticated adhesion machinery are associated with a variety of human pathologies. Here, we outline a simple protocol to monitor alterations in cell adhesion to the ECM, for example, following genetic manipulations or overexpression of a protein of interest or in response to drug treatment, using the xCELLigence real-time cell analysis (RTCA) system. [摘要]  细胞与相邻细胞和基础细胞外基质(ECM)的粘附是多细胞生物存在的基本要求。 因此,细胞粘附的形成,稳定和解离在时间和空间上受到严格的控制,复杂的粘附机制内的干扰与各种人类病理有关。 在这里,我们概述了一个简单的协议,以监测细胞粘附到ECM的变化,例如,在遗传操作或目标蛋白的过表达或响应药物治疗后,使用xCELLigence实时细胞分析(RTCA)系统。

【背景】负责细胞粘附到下面的ECM的主要分子是称为整联蛋白的跨膜异二聚体受体家族。整合素的激活和与ECM的结合触发向整合素胞质尾部募集大量信号传导,支架和细胞骨架蛋白。总之,这些粘附成分代表了负责调节许多重要细胞过程(包括细胞增殖,存活,迁移和分化)的复杂且高度动态的机制。与维持正常生理功能的重要角色一致,整合素介导的粘附和信号传导失调是许多人类疾病(包括出血性疾病,心血管疾病和癌症)发病的先导(Giancotti and Ruoslahti,1999;Bökeland Brown,2002; Huveneers and Danen,2009; Legate等人,2009; Bouvard等人,2013; Calderwood等人,2013; Horton等人,等,2015; Seguin等,,2015)。因此,整合素依赖性细胞 - 细胞外基质粘附的研究是一个研究热点,也是许多生物学领域广泛关注的课题。 ...

Determination of Reduced and Total Glutathione Content in Extremophilic Microalga Galdieria phlegrea
Author:
Date:
2017-07-05
[Abstract]  Glutathione is an important molecule involved in the primary and secondary metabolism of all organisms. The Glutathione redox status is an indicator of the cellular redox state. Therefore, it is important to have precise methods on hand to determine the glutathione redox status in the cell. In this protocol, we describe an improved spectrophotometric method to estimate the content of reduced (GSH) and oxidized (GSSG) forms of glutathione in the extremophilic microalga Galdieria phlegrea. [摘要]  谷胱甘肽是涉及所有生物体的初级和次级代谢的重要分子。 谷胱甘肽氧化还原状态是细胞氧化还原状态的指标。 因此,重要的是要有精确的方法来确定细胞中的谷胱甘肽氧化还原状态。 在本协议中,我们描述了一种改进的分光光度法,用于估计极地微藻Galdieria phlegrea中还原(GSH)和氧化(GSSG)形式的谷胱甘肽的含量。
【背景】谷胱甘肽(γ-L-谷氨酰基-L-半胱氨酰 - 甘氨酸)是存在于所有已知生物体中的必需三肽,其范围从细菌到人类(Frendo等人,2013)。它涉及到几种不同的细胞保护作用(图1)。谷胱甘肽被认为是具有氧化还原信号功能的优异的抗氧化分子。它还参与对非生物和生物胁迫的反应,并涉及细胞的初级代谢(C,N,S代谢)(Noctor et al。,2012;Hernándezet al。 ,2015; Salbitani等人,2015)。
 在植物细胞中,还原型和氧化形式的谷胱甘肽(GSH / GSSG)之间的比例在信号传导和许多防御机制的激活中起重要作用(Foyer和Noctor,2012; Salbitani等人, ,2015)。通常严格控制的GSH / GSSG氧化还原状态可能在应力条件下瞬时转向稍微氧化的值(Tausz等人,2004)。
 在过去,一些研究人员已经开发和修改了分光光度法来确定几种生物体中的GSH和GSSG(Anderson,1985; ...

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