{{'Search' | translate}}
 

QubitTM Assay Tubes

Company: Thermo Fisher Scientific
Catalog#: Q32856
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Isolation of Commensal Escherichia coli Strains from Feces of Healthy Laboratory Mice or Rats
Author:
Date:
2018-03-20
[Abstract]  The colonization abundance of commensal E. coli in the gastrointestinal tract of healthy laboratory mice and rats ranges from 104 to 106 CFU/g feces. Although very well characterized, the family that E. coli belongs to has a very homogeneous 16S rRNA gene sequence, making the identification from 16S rRNA sequencing difficult. This protocol provides a procedure of isolating and identifying commensal E. coli strains from a healthy laboratory mouse or rat feces. The method can be applied to isolate commensal E. coli from other laboratory rodent strains. [摘要]  共生E的殖民丰度。 大肠杆菌在健康实验小鼠和大鼠的胃肠道中的范围为10 4至10 6 CFU / g粪便。 虽然描述得非常好,但那个家族就是这样的。 大肠杆菌属于具有非常均一的16S rRNA基因序列,使得从16S rRNA测序鉴定困难。 该协议提供了分离和识别共生E的程序。 来自健康实验室小鼠或大鼠粪便的大肠杆菌菌株。 该方法可以应用于隔离共生电子。 来自其他实验室啮齿类动物的大肠杆菌。

【背景】大肠杆菌是革兰氏阴性兼性厌氧菌,其仅构成脊椎动物肠道微生物群的一小部分,但在微生物相互作用,免疫调节和代谢功能中起关键作用(Tenaillon等人。,2010)。作为最好的模式微生物之一,共生E。已经越来越多地研究大肠杆菌菌株以揭示肠道共生微生物适应独特生态位并影响宿主生理机制。然而,不同菌株之间的高度同源性在共生E的鉴定和表征上提出了困难。基于16S rRNA测序方法的大肠杆菌。由于新一代测序技术的发展和全基因组的大规模分析,我们能够识别共生E。根据基因组中毒力基因的存在,分离自不同宿主的胃肠道的大肠杆菌菌株。在这个协议中,我们展示了一种分离和识别共生E的方法。使用选择性培养基和全基因组测序从实验室小鼠或大鼠获得大肠杆菌菌株。但是,应该指出的是,共生E的存在。大肠杆菌在实验室动物中取决于设施的供应商和环境条件。

Adapting the Smart-seq2 Protocol for Robust Single Worm RNA-seq
Author:
Date:
2018-02-20
[Abstract]  Most nematodes are small worms that lack enough RNA for regular RNA-seq protocols without pooling hundred to thousand of individuals. We have adapted the Smart-seq2 protocol in order to sequence the transcriptome of an individual worm. While developed for individual Steinernema carpocapsae and Caenorhabditis elegans larvae as well as embryos, the protocol should be adaptable for other nematode species and small invertebrates. In addition, we describe how to analyze the RNA-seq results using the Galaxy online environment. We expect that this method will be useful for the studying gene expression variances of individual nematodes in wild type and mutant backgrounds. [摘要]  大多数线虫是小蠕虫,缺乏足够的RNA用于常规的RNA-seq协议,而没有汇集成千上万的个体。 我们已经调整了Smart-seq2协议来排序单个蠕虫的转录组。 虽然针对Steinernema carpocapsae和Caenorhabditis elegans幼虫以及胚胎开发,但该方案应该适用于其他线虫物种和小无脊椎动物。 另外,我们介绍如何使用Galaxy在线环境分析RNA-seq结果。 我们预计这种方法将有助于研究野生型和突变体背景个体线虫的基因表达差异。

【背景】低输入RNA-seq方案和扩增试剂盒,例如Smart-seq(Takara Bio,USA,Inc)和SuperAmp(Miltenyl Biotec,Inc),已经越来越多地开发和商业化,作为对低输入RNA-基于小组织,单一微生物和单细胞的seq研究。这些研究经常探索并解决特定群体(例如细胞群体,复杂组织或微生物群体)的个体中的异源基因表达。针对微生物(如线虫)的低输入RNA-seq方案的改进和适应将通过允许在单一线虫水平上分析基因表达异质性而极大地有益于线虫领域。在这里,我们已经调整了单细胞RNA-seq方案Smart-seq2(Picelli等人,2013和2014; Trombetta等人,2014),对于单线虫RNA测序。我们成功地在昆虫寄生线虫Steinernema ...

Oral Microbiome Characterization in Murine Models
Author:
Date:
2017-12-20
[Abstract]  The oral microbiome has been implicated as a trigger for immune responsiveness in the oral cavity, particularly in the setting of the inflammatory disease periodontitis. The protocol presented here is aimed at characterizing the oral microbiome in murine models at steady state and during perturbations of immunity or physiology. Herein, we describe murine oral microbiome sampling procedures, processing of low biomass samples and subsequent microbiome characterization based on 16S rRNA gene sequencing. [摘要]  口腔微生物组被认为是口腔免疫应答的触发因素,特别是在炎性疾病牙周炎的形成中。 这里提出的协议旨在描述在稳定状态和扰动免疫或生理学的小鼠模型中的口腔微生物群。 在此,我们描述了鼠类口腔微生物群落取样程序,低生物量样品的处理和随后的基于16S rRNA基因测序的微生物群鉴定。

【背景】微生物组在调节组织特异性免疫应答(特别是在屏障部位)中起关键作用(Belkaid和Harrison,2017)。在这些屏障环境中,例如胃肠道和皮肤,选择的共生物显示能够驱动特定免疫细胞群体的发育(Ivanov等人,2009; Naik等人。,2012)。我们的工作最近开始探索口腔微生物组在剪裁组织免疫力方面的影响,尤其是在牙龈处,一个脆弱的口腔屏障部位(Abusleme和Moutsopoulos,2016; Dutzan等人,2017)。

在人类中,众所周知口腔中含有丰富多样的微生物(Human Microbiome Project,2012)。口腔微生物群落的改变与常见的口腔疾病,牙周炎(一种影响牙龈组织并导致组织损伤的炎症)有关(Griffen等人,2012; Abusleme等人。,2013; Moutsopoulos et al 。,2015)。迄今为止,动物模型已经有助于解决微生物组在各种生理和病理条件中的作用(Turnbaugh等人,2006; ...

Comments