{{'Search' | translate}}
 

Leica L2 Compact, Modular Cold Light Source For Stereomicroscopes

Company: Leica Microsystems
Catalog#: Leica L2
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Isolation and Infection of Drosophila Primary Hemocytes
Author:
Date:
2017-06-05
[Abstract]  Phagocytosis of invading pathogens and their subsequent clearance in lysosomes is important for organismal fitness. We have devised the following protocol to extract phagocytic hemocytes from wild-type and mutant Drosophila larvae and infect the isolated hemocytes with GFP-labeled E. coli to measure the rate of phagocytosis and degradation within individual hemocytes over time. [摘要]  入侵病原体的吞噬作用及其随后在溶酶体中的清除对于有机体适应性是重要的。我们设计了以下方案从野生型和突变型果蝇幼虫中提取吞噬性血细胞,并用GFP标记的E感染分离的血细胞。大肠杆菌以测量个体血细胞内吞噬和降解的速度。

背景 下面描述的实验可用于研究吞噬体的生物发生,成熟和向溶酶体的递送。细菌积累已经在免疫受损的果蝇的背景下得到充分的研究,其具有IMD或Toll信号传导中的缺陷,并导致抗微生物肽的表达降低(例如,Lemaitre和Hoffmann ,2007; Kleino和Silverman,2014)。细菌感染的细胞响应在果蝇中的研究较少,大多数研究集中于干扰血细胞对细菌的最初吞噬吞噬的突变(Kocks等人,2005年) ;帕森斯和福利,2016)。这种细菌摄取是直接使用FACS分析进行测量(Tirouvanziam等人,2004)。然而,对于吞噬体成熟的详细分析,我们发现检查附着在玻璃盖板上的个体血细胞是有利的(Akbar等人,2011; Rahman等人。 ,2012; Akbar等人,2016),因为这个过程为我们研究吞噬体成熟提供了时间和空间分辨率的最佳组合。

Comments