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10% normal goat serum

Company: Jackson ImmunoResearch
Catalog#: 005-000-121
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Isolation and Infection of Drosophila Primary Hemocytes
Author:
Date:
2017-06-05
[Abstract]  Phagocytosis of invading pathogens and their subsequent clearance in lysosomes is important for organismal fitness. We have devised the following protocol to extract phagocytic hemocytes from wild-type and mutant Drosophila larvae and infect the isolated hemocytes with GFP-labeled E. coli to measure the rate of phagocytosis and degradation within individual hemocytes over time. [摘要]  入侵病原体的吞噬作用及其随后在溶酶体中的清除对于有机体适应性是重要的。我们设计了以下方案从野生型和突变型果蝇幼虫中提取吞噬性血细胞,并用GFP标记的E感染分离的血细胞。大肠杆菌以测量个体血细胞内吞噬和降解的速度。

背景 下面描述的实验可用于研究吞噬体的生物发生,成熟和向溶酶体的递送。细菌积累已经在免疫受损的果蝇的背景下得到充分的研究,其具有IMD或Toll信号传导中的缺陷,并导致抗微生物肽的表达降低(例如,Lemaitre和Hoffmann ,2007; Kleino和Silverman,2014)。细菌感染的细胞响应在果蝇中的研究较少,大多数研究集中于干扰血细胞对细菌的最初吞噬吞噬的突变(Kocks等人,2005年) ;帕森斯和福利,2016)。这种细菌摄取是直接使用FACS分析进行测量(Tirouvanziam等人,2004)。然而,对于吞噬体成熟的详细分析,我们发现检查附着在玻璃盖板上的个体血细胞是有利的(Akbar等人,2011; Rahman等人。 ,2012; Akbar等人,2016),因为这个过程为我们研究吞噬体成熟提供了时间和空间分辨率的最佳组合。

Muscle Histology Characterization Using H&E Staining and Muscle Fiber Type Classification Using Immunofluorescence Staining
Author:
Date:
2017-05-20
[Abstract]  Muscle function is determined by its structure and fiber type composition. Here we describe a protocol to examine muscle histology and myofiber types using hematoxylin and eosin (H&E) and immunofluorescence staining, respectively. H&E stain nucleus in blue and cytoplasm in red, therefore allowing for morphological analyses, such as myofiber diameter, the presence of degenerated and regenerated myofibers, and adipocytes and fibrotic cells. Muscle fibers in adult skeletal muscles of rodents are classified into 4 subtypes based on the expression of myosin heavy chain proteins: Myh7 (type I fiber), Myh2 (type IIA fiber), Myh1 (type IIX fiber), Myh4 (type IIB fiber). A panel of monoclonal antibodies can be used to specifically label these muscle fiber subtypes. These protocols are commonly ... [摘要]  肌肉功能由其结构和纤维类型组成决定。 这里我们描述一个协议,分别检查使用苏木精和伊红(H&E)和免疫荧光染色的肌肉组织学和肌纤维类型。 H&E在蓝色和细胞质红色染色核,因此允许形态学分析,如肌纤维直径,退化和再生肌纤维的存在,以及脂肪细胞和纤维化细胞。 基于肌球蛋白重链蛋白Myh7(I型纤维),Myh2(IIA型纤维),Myh1(IIX型纤维),Myh4(IIB型纤维)的表达,将啮齿动物成年骨骼肌肌肉纤维分为4种亚型:。 一组单克隆抗体可用于特异性标记这些肌纤维亚型。 这些方案通常用于肌肉发育,生长和再生的研究(例如:Wang等,2015; Nie等,2016; Yue et al。,2016; Wang et al。,2017)。
【背景】骨骼肌由肌细胞,脂肪细胞,成纤维细胞和其他细胞类型组成。 多核心肌细胞,骨骼肌的主要组成,也称为肌纤维(肌纤维)。 肌肉组织学研究是肌肉功能研究的常规方法。 一般来说,肌纤维的直径和脂肪细胞的程度和纤维化面积与肌肉力量有关(Yue et al。,2016)。 此外,中心有核肌纤维的存在作为肌肉再生期间新再生肌纤维的替代指标(Wang等,2017)。 基于差异代谢性状和肌球蛋白重链(MyHC)亚型的表达,肌纤维分为四种类型(I,IIa,IIx和IIb)。 ...

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