| Direct Visualization of the Multicopy Chromosomes in Cyanobacterium Synechococcus elongatus PCC 7942
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Author:
Date:
2018-08-05
[Abstract] Cyanobacteria are prokaryotic organisms that carry out oxygenic photosynthesis. The fresh water cyanobacterium Synechococcus elongatus PCC 7942 is a model organism for the study of photosynthesis and gene regulation, and for biotechnological applications. Besides several freshwater cyanobacteria, S. elongatus 7942 also contains multiple chromosomal copies per cell at all stages of its cell cycle. Here, we describe a method for the direct visualization of multicopy chromosomes in S. elongatus 7942 by fluorescence in situ hybridization (FISH).
[摘要] 蓝细菌是进行含氧光合作用的原核生物。 淡水蓝藻 Synechococcus elongatus PCC 7942是用于研究光合作用和基因调控以及生物技术应用的模式生物。 除了几种淡水蓝藻， S. 细胞 7942在其细胞周期的所有阶段每个细胞还含有多个染色体拷贝。 在这里，我们描述了一种直接可视化 S中多拷贝染色体的方法。 通过荧光原位杂交（FISH）测定细菌 7942。
【背景】蓝藻是原核微生物，其利用与高等植物中的叶绿体类似的产氧光合系统。虽然 Escherichia coli 和枯草芽孢杆菌等细菌具有单个圆形染色体，但是几种淡水蓝细菌每个细胞有多个圆形染色体（Mann和Carr，1974; Labarre 等人，1989; Binder和Chisholm，1995）。淡水蓝藻 Synechococcus elongatus PCC 7942（以下简称 S.longatus 7942）每个细胞携带3-8个染色体拷贝（Griese et al。，2011; Watanabe et al。，2012; Watanabe et al。，2015）。已经建立了荧光报告子 - 操纵子系统来获取 S的多拷贝染色体的图像。 elongatus 7942（Chen et al。，2012; Jain et ...
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| Uptake Assays to Monitor Anthracyclines Entry into Mammalian Cells
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Author:
Date:
2017-09-20
[Abstract] Anthracyclines, such as doxorubicin and daunorubicin, are DNA damaging agents that autofluoresce and can be readily detected in cells. Herein, we developed suitable assays to quantify and localize daunorubicin in mammalian cells. These assays can be exploited to identify components that are involved in the uptake of anthracyclines.
[摘要] 蒽环类药物，如多柔比星和柔红霉素，是DNA损伤剂，其可自发荧光并且可以容易地在细胞中检测到。 在这里，我们开发了合适的测定法来定量和定位哺乳动物细胞中的柔红霉素。 可以利用这些测定来鉴定参与蒽环类药物吸收的成分。
【背景】蒽环类药物，如多柔比星和柔红霉素，通过损伤DNA起作用，用于治疗各种类型的癌症，包括急性骨髓性白血病。当癌症患者被系统地给予蒽环类抗生素时，有几个因素限制了到达肿瘤部位的药物的量（Chauncey，2001; Deng等，2014; Riganti等，2015）。在肿瘤中，对癌细胞的药物活性受到药物吸收不良，药物流出过量以及细胞靶标变化的限制。几十年来，这些DNA损伤剂如何进入癌细胞还不清楚（Aouida等，2010; Cesar-Razquin等，2015; Zhang等，2015）。为了解决这个问题，我们开发了三种可靠的体外测定法来监测柔红霉素在细胞中的积累。这些测定中的两个是定量的，需要获得荧光活化细胞分选（FACS）口径和Fluoroskan仪器，第三个是使用落射荧光显微镜进行半定量。使用这些测定法，我们确定柔红霉素以时间和浓度依赖的方式进入细胞，并且每种细胞类型显示不同的摄取速率，这表明活性过程参与蒽环类药物的摄入（Andreev等人， ...
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| Tumorigenicity Assay in Nude Mice
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Author:
Date:
2017-07-05
[Abstract] Tumorigenicity refers to the ability of cultured cells to develop viable tumors in immune-deficient animals. The goal of this protocol is to illustrate tumorigenicity assay by subcutaneous tumor-cell-transplantation in nude mice. Target cells are transplanted to 6-week-old nude mice subcutaneously and the tumor growth is monitored over a period of observation or treatment. When tumor grows to a pre-determined size or by the end of the limited period, the nude mice will be euthanatized and the xenograft will be removed for further examination.
[摘要] 致瘤性是指培养的细胞在免疫缺陷型动物中发展活肿瘤的能力。 该方案的目的是通过裸鼠皮下肿瘤细胞移植来说明致瘤性测定。 将靶细胞皮下移植到6周龄的裸鼠中，并在观察或治疗期间监测肿瘤生长。 当肿瘤生长至预定大小或在有限期结束时，裸鼠将被安乐死，异种移植物将被去除以进一步检查。
【背景】肿瘤发病率高，死亡率高，是导致死亡的主要原因之一，也是一个重大的公共卫生问题。 每年进行广泛的研究，以探索肿瘤发病机制和抗肿瘤治疗。 在癌症研究的过程中，裸鼠中的致瘤性测定是用于监测体内肿瘤生长的广泛使用的实验（Giovanella et al。，1974）。 用于致瘤性测定的最常用的动物系统是无胸腺裸鼠（Petricciani等人，1973），其中恶性细胞可以皮下或肾下 - 荚膜移植（van Meir，1997）。 对于具有相对低致瘤性能力的细胞，通过照射（30-60Gy）或植入Matrigel（Pretlow等人，1991）可以提高摄取率。 致瘤性测定提供了产生人细胞衍生的肿瘤组织用于测量肿瘤细胞恶性肿瘤和评价抗肿瘤药物功效的方法。
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