| Ex vivo Whole-cell Recordings in Adult Drosophila Brain
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Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract] Cost-effective and efficient, the fruit fly (Drosophila melanogaster) has been used to make many key discoveries in the field of neuroscience and to model a number of neurological disorders. Great strides in understanding have been made using sophisticated molecular genetic tools and behavioral assays. Functional analysis of neural activity was initially limited to the neuromuscular junction (NMJ) and in the central nervous system (CNS) of embryos and larvae. Elucidating the cellular mechanisms underlying neurological processes and disorders in the mature nervous system have been more challenging due to difficulty in recording from neurons in adult brains. To this aim we developed an ex vivo preparation in which a whole brain is isolated from the head capsule of an adult ...
[摘要] 果蝇（ Drosophila melanogaster ）具有成本效益和效率，已被用于在神经科学领域进行许多重要发现并模拟许多神经疾病。使用复杂的分子遗传工具和行为测定已经在理解方面取得了很大进展。神经活动的功能分析最初仅限于神经肌肉接头（NMJ）和胚胎和幼虫的中枢神经系统（CNS）。阐明成熟神经系统中神经过程和病症潜在的细胞机制由于难以从成人大脑中的神经元记录而更具挑战性。为此目的，我们开发了一种离体制剂，其中从成年蝇的头部胶囊中分离出全脑并将其置于记录室中。通过这种制备，可以将成年大脑中鉴定的神经元的全细胞记录与遗传，药理学和环境操作相结合，以探索神经元功能和功能障碍的细胞机制。它还作为评估通过用于治疗神经疾病的行为测定法鉴定的新疗法的作用机制的重要平台。在这里，我们提出了成人 Drosophila 脑中离体制剂和全细胞记录的方案。
【背景】果蝇（ Drosophila melanogaster ）已被用于在神经科学的各个基本领域（包括学习和记忆）中取得重要发现（Bolduc et al。，2008; Cervantes- Sandoval et al。，2016），突触形成和调节（Genç et al。，2017）和昼夜节律（Allada et al。 ，1998; Guo et ...
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| Physical Removal of the Midbody Remnant from Polarised Epithelial Cells Using Take-Up by Suction Pressure (TUSP)
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Author:
Date:
2017-04-20
[Abstract] In polarised epithelial cells the midbody forms at the apical cell surface during cytokinesis. Once severed, the midbody is inherited by one of the daughter cells remaining tethered to the apical plasma membrane where it participates in non-cytokinetic processes, such as primary ciliogenesis. Here, we describe a novel method to physically remove the midbody remnant from cells and assess the possible effects caused by its loss (Bernabé-Rubio et al., 2016).
[摘要] 在极化上皮细胞中，胞质在细胞分裂过程中在顶端细胞表面形成。 一旦切断，中间体被遗留于其中参与非细胞运动过程（例如初级细胞发生）的顶端质膜的其中一个子细胞遗传。 在这里，我们描述了一种从细胞中物理去除中间体残留物并评估其损失所引起的可能影响的新方法（Bernabé-Rubio et al。，2016）。
【背景】中间体或Flemming体是在有丝分裂的最后阶段在子细胞之间形成的细胞间桥的中心部分。通过运输（ESCRT）机器所需的内体分选复合体，桥梁两侧的脱落导致两个子细胞的物理分离（Green等，2012）。除了其在有丝分裂调节中的已知功能外，最近的研究已经开始阐明中间体后有丝分裂后的作用。由于其在肾细胞中腔内形成的启动中的作用，中间体被假定为极性提示（Li等，2014）。最近，已经证明，中间体残留物通过极化的Madin-Darby犬肾（MDCK）细胞（Bernabé-Rubio等，2016）直接参与初级细胞发生。还发现在秀丽隐杆线虫（Singh and Pohl，2014）的发展过程中以及在确定细胞命运和分化过程中，形成背轴的作用（Kuo et al。，2011）。以前的研究使用激光消融来损害中间体残留的功能。然而，当在培养的细胞系中进行时，由于质膜和近端胞质元件的损伤，激光烧蚀可导致细胞死亡。因此，我们设计了一个温和的程序，我们称之为“抽吸压力”（TUSP）。 ...
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