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Date:
2017-04-20
[Abstract] Glioblastoma multiforme (GBM) is a grade 4 astrocytoma tumor in central nervous system. Astrocytes can be isolated from human GBM. Study of astrocytes can provide insights about the formation, progression and recurrence of glioblastoma. For using isolated astrocytes, new studies can be designed in the fields of pharmacology, neuroscience and neurosurgery for glioblastoma treatment. This protocol describes the details for preparing high purity primary astrocytes from human GBM. Tumor tissue is disrupted using mechanical dissociation and chemical digestion in this protocol. 2 weeks after plating the cell suspension in culture, primary astrocytes are available for further subculturing and immunocytochemistry of S100-beta antigen.
[摘要] 多形性葡萄球菌（GBM）是中枢神经系统中的4级星形细胞瘤。星形胶质细胞可以从人类GBM中分离出来。研究星形胶质细胞可以提供关于胶质母细胞瘤的形成，进展和复发的见解。对于使用孤立的星形胶质细胞，可以在药理学，神经科学和神经外科学领域设计新的研究用于成胶质细胞瘤治疗。该方案描述了从人类GBM制备高纯度原发性星形胶质细胞的细节。在本方案中使用机械解离和化学消化破坏肿瘤组织。培养细胞悬液2周后，初级星形胶质细胞可用于S100-β抗原的进一步传代培养和免疫细胞化学。
星形胶质细胞是提供脑神经元结构和营养支持的神经胶质细胞。星形胶质细胞的细胞周期似乎在星形细胞瘤脑肿瘤中被破坏。世界卫生组织根据恶性肿瘤将星形细胞分为四级。多形性成胶质细胞瘤（GBM，IV级）是星形细胞瘤最恶性的形式。成胶质细胞瘤的特征在于具有快速增殖速率和血管生成的侵袭性细胞。胶质母细胞瘤患者预后差。目前的治疗方法，包括手术，化学治疗和放射治疗对患者的治疗没有很好的疗效。患者的中位生存时间大约在治疗后一年（Stuup等人，2005; Wen和Kesari，2008）。许多研究人员专注于评估胶质母细胞瘤细胞的生理功能和凋亡的研究，以便检测更有效的治疗方法。在这里，我们提出了一种从没有成纤维细胞污染的人胶质母细胞瘤标本中分离高纯度原代星形胶质细胞的方法（Hashemi等人，2016）。
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