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10 ml serological pipette

Company: Thermo Fisher Scientific
Catalog#: 170356
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Company-protocol()
Other protocol()

Drosophila Model of Leishmania amazonensis Infection
Author:
Date:
2017-12-05
[Abstract]  This protocol describes how to generate and harvest antibody-free L. amazonensis amastigotes, and how to infect adult Drosophila melanogaster with these parasites. This model recapitulates key aspects of the interactions between Leishmania amastigotes and animal phagocytes. [摘要]  该协议描述了如何产生和收获无抗体的L型。 amazonensis amastigotes,以及如何用这些寄生虫感染成年果蝇(Drosophila melanogaster)。 这个模型概括了利什曼原虫和动物吞噬细胞之间相互作用的关键方面。

【背景】由利什曼原虫引起的利什曼病,根据宿主的寄生虫种类和免疫状态,影响皮肤,粘膜或内脏器官。 尽管小鼠感染模型已经提供了我们对这种寄生虫感染的大部分了解,但它并不适合于大规模的探索性方法。 在我们的实验室,我们利用果蝇黑腹果蝇的易处理和强大的遗传学来建立利什曼原虫感染的模型并进行小规模的筛选来鉴定涉及的宿主基因 在这些寄生虫的吞噬中(Okuda等人,2016)。 具体而言,使用UAS-GAL4表达系统(Brand和Perrimon,1993),可能与吞噬作用相关的一组基因被特异性敲低,监测突变体感染的苍蝇的存活和寄生物负荷以鉴定 调节感染的因素。

Isolation of the Dot/Icm Type IV Secretion System Core Complex from Legionella pneumophila for Negative Stain Electron Microscopy Studies
Author:
Date:
2017-04-20
[Abstract]  Legionella possesses a pivotal secretion machinery to deliver virulence factors to eukaryotic host cells. In this protocol, we describe the procedure for isolation of the native core complex of the Dot/Icm type IV secretion system from L. pneumophila aiming to perform biochemical and transmission electron microscopy analyses. [摘要]  军团菌具有关键的分泌机制,以将毒力因子递送至真核宿主细胞。在本协议中,我们描述了从L / L分离Dot / Icm IV型分泌系统的天然核心复合物的步骤。肺炎支原体旨在进行生物化学和透射电子显微镜分析。

嗜肺军团菌是革兰氏阴性细菌病原体,其导致被称为退伍军人病的肺部感染(Fields等人,2002)。 L。嗜肺杆菌利用由 dot / cm 基因编码的IV型分泌系统(T4SS)将大约300种细菌蛋白转运到其真核宿主细胞质中以劫持细胞过程(Hubber和Roy, 2010)。由超过20种蛋白组成,T4SS是建立在细菌内膜和外膜上的纳米机器(Nagai和Kubori 2011; Kubori和Nagai 2016)。 Dot / Icm T4SS的核心复合物是系统的生物化学稳定部分,并形成桥接内膜和外膜的输送导管(Kubori等人,2014)。核心复合物由至少五种蛋白质组成;三种外膜相关蛋白,DotC,DotD和DotH,以及两种内膜蛋白DotF和DotG(Vincent等人,2006)。基于来自鼠伤寒沙门氏菌的另一种细菌纳米机械的III型分泌系统的生物化学分离方法(Kubori等人,1998; Marlovits等人, ...

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