| Tracking Lipid Transfer by Fatty Acid Isotopolog Profiling from Host Plants to Arbuscular Mycorrhiza Fungi
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Author:
Date:
2018-04-05
[Abstract] Lipid transfer from host plants to arbuscular mycorrhiza fungi was hypothesized for several years because sequenced arbuscular mycorrhiza fungal genomes lack genes encoding cytosolic fatty acid synthase (Wewer et al., 2014; Rich et al., 2017). It was finally shown by two independent experimental approaches (Jiang et al., 2017; Keymer et al., 2017; Luginbuehl et al., 2017). One approach used a technique called isotopolog profiling (Keymer et al., 2017). Isotopologs are molecules, which differ only in their isotopic composition. For isotopolog profiling an organism is fed with a heavy isotope labelled precursor metabolite. Subsequently, the labelled isotopolog composition of metabolic products is analysed via mass spectrometry. The ...
[摘要] 因为测序的丛枝菌根真菌基因组缺乏编码胞质脂肪酸合酶的基因（Wewer等人，2014; Rich等人，2014），因此假定脂质从宿主植物转移到丛枝菌根真菌数年。 / em>，2017）。最终通过两种独立的实验方法（Jiang等人，2017; Keymer等人，2017; Luginbuehl等人， ）， 2017年）。一种方法使用称为同位素体谱分析的技术（Keymer等人，2017）。同位素体是分子，它们的同位素组成不同。对于同位素生物学分析，生物体被喂以重同位素标记的前体代谢物。随后，通过质谱分析代谢产物的标记同位素组成。检测到的目标代谢物的同位素体模式产生关于代谢途径和通量的信息（Ahmed et al。，2014）。以下协议描述了一个实验装置，该装置能够在由丛枝菌根真菌及其相关真菌胞外菌丝体定植的植物根中分离出脂肪酸的单独同位素分布图，以阐明两种共生生物之间的通量。我们预测，如果两种相互作用的生物体可以物理分离，则该策略还可以用于研究其他生物体之间的代谢物通量。
【背景】丛枝菌根真菌是生物营养生物。因此，它们不能独立栽培，而是依靠与寄主植物的相互作用来维持生命并完成它们的生命周期。这一特征使得研究两种共生生物，特别是单独的真菌具有挑战性。
为了培养，处理和收获与宿主根分开的真菌，开发了2室培养皿系统，并将其用于以前工作中的标记研究（Bécard和Fortin，1988; ...
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| Extraction and Activity of O-acetylserine(thiol)lyase (OASTL) from Microalga Chlorella sorokiniana
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2017-06-20
[Abstract] O-acetylserine(thiol)lyase (OASTL) is an enzyme catalysing the reaction of inorganic sulphide with O-acetylserine to form the S-containing amino acid L-cysteine. Here we describe an improved protocol to evaluate the activity of this enzyme from the microalga Chlorella sorokiniana. It is a colorimetric assay based on the reaction between cysteine, the product of OASTL activity, and ninhydrin reagent, which forms a thiazolidine (Thz).
[摘要] O-乙酰丝氨酸（硫醇）裂解酶（OASTL）是催化无机硫化物与O-乙酰丝氨酸反应形成含S氨基酸L-半胱氨酸的酶。 在这里我们描述一个改进的方案来评估这种酶从微藻小球藻的活性。 它是基于半胱氨酸（OASTL活性的产物）和形成噻唑烷（Thz）的茚三酮试剂之间的反应的比色测定。
【背景】在古代，细菌，微藻和植物中，半胱氨酸（Cys）的合成代表了同化硫酸盐还原的决定性阶段（Hell和Wirtz，2008）。 Cys生物合成是硫同化的最后一步，由丝氨酸乙酰转移酶（SAT，EC 2.3.1.30）和O-乙酰丝氨酸（硫醇）裂解酶（OASTL，EC 4.2.99.8）催化的两个相互连接的反应进行（Salbitani等，2014 ; Carfagna等，2015）。
OASTLs催化O-乙酰丝氨酸（OAS）和硫化物之间的反应形成Cys和乙酸酯（图1）。
在血管植物中，OASTLs位于叶绿体，线粒体和胞质溶胶中，具有不同的Cys合成功能（Jost等，2000; Birke等，2013）。在微藻中，OASTLs主要在叶绿体中主要定位（Merchant et al。，2007; Bromke，2013）。然而，在小球藻Sorokiniana中，发现两种同种型，氯代和胞质OASTL，在S剥夺条件下（Carfagna等，2011）。
许多研究人员已经制定和修改了确定植物和细菌中OASTLs活性的方案（Gaitonde，1967; ...
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| Establishment of New Split-root System by Grafting
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2017-02-20
[Abstract] A new split-root system was used to simulate non-uniform salt, drought or nutrient deficiency stress in the root zone, in which the root system was divided into two or more equal portions. Here, we established a split-root system by grafting of cotton seedlings. In contrast to the conventional split-root, the main roots of the new system remained intact, which provided a better system for studying cotton response to unequal treatment in the root zone. The new system was suitable for plant growth in nutrient solution and the two root systems can fully be immerged in the nutrient solution.
[摘要] 采用新的分裂系统模拟根系中不均匀的盐，干旱或营养缺乏胁迫，根系分为两个或更多等份。在这里，我们通过嫁接棉花幼苗建立了根系。与传统的根系相反，新系统的主要根源保持不变，为根区不平等处理棉花的响应提供了更好的系统。新系统适用于营养液中的植物生长，两种根系可以完全浸入营养液中。
背景 分裂根系被用于研究植物对不均匀土壤条件的响应，如部分根部干燥，不均匀盐分布和异质营养分布。棉花和其他植物中常规的根系系统是通过在切割幼苗的主根之后将侧根分成两等份（Bazihizina等人，2009; Dong＆ et al。，2010）。新系统适合于营养液和环绕实验中的植物生长，因为移植物的根部和位置之间有足够的距离（Kong＆amp; et al。，2012和2016）。
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