| Tracking Lipid Transfer by Fatty Acid Isotopolog Profiling from Host Plants to Arbuscular Mycorrhiza Fungi
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Author:
Date:
2018-04-05
[Abstract] Lipid transfer from host plants to arbuscular mycorrhiza fungi was hypothesized for several years because sequenced arbuscular mycorrhiza fungal genomes lack genes encoding cytosolic fatty acid synthase (Wewer et al., 2014; Rich et al., 2017). It was finally shown by two independent experimental approaches (Jiang et al., 2017; Keymer et al., 2017; Luginbuehl et al., 2017). One approach used a technique called isotopolog profiling (Keymer et al., 2017). Isotopologs are molecules, which differ only in their isotopic composition. For isotopolog profiling an organism is fed with a heavy isotope labelled precursor metabolite. Subsequently, the labelled isotopolog composition of metabolic products is analysed via mass spectrometry. The ...
[摘要] 因为测序的丛枝菌根真菌基因组缺乏编码胞质脂肪酸合酶的基因（Wewer等人，2014; Rich等人，2014），因此假定脂质从宿主植物转移到丛枝菌根真菌数年。 / em>，2017）。最终通过两种独立的实验方法（Jiang等人，2017; Keymer等人，2017; Luginbuehl等人， ）， 2017年）。一种方法使用称为同位素体谱分析的技术（Keymer等人，2017）。同位素体是分子，它们的同位素组成不同。对于同位素生物学分析，生物体被喂以重同位素标记的前体代谢物。随后，通过质谱分析代谢产物的标记同位素组成。检测到的目标代谢物的同位素体模式产生关于代谢途径和通量的信息（Ahmed et al。，2014）。以下协议描述了一个实验装置，该装置能够在由丛枝菌根真菌及其相关真菌胞外菌丝体定植的植物根中分离出脂肪酸的单独同位素分布图，以阐明两种共生生物之间的通量。我们预测，如果两种相互作用的生物体可以物理分离，则该策略还可以用于研究其他生物体之间的代谢物通量。
【背景】丛枝菌根真菌是生物营养生物。因此，它们不能独立栽培，而是依靠与寄主植物的相互作用来维持生命并完成它们的生命周期。这一特征使得研究两种共生生物，特别是单独的真菌具有挑战性。
为了培养，处理和收获与宿主根分开的真菌，开发了2室培养皿系统，并将其用于以前工作中的标记研究（Bécard和Fortin，1988; ...
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| Transient Gene Expression for the Characteristic Signal Sequences and the Estimation of the Localization of Target Protein in Plant Cell
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Author:
Date:
2018-02-20
[Abstract] We have proposed and tested a method for characterization of the signal sequences and determinations of target protein localization in a plant cell. This method, called the AgI-PrI, implies extraction of protoplasts from plant tissues after agroinfiltration. The suggested approach combines the advantages of two widely used methods for transient gene expression in plants–agroinfiltration and transfection of isolated protoplasts. The AgI-PrI technic can be applied to other plant species.
[摘要] 我们已经提出并测试了用于表征信号序列和确定植物细胞中目标蛋白质定位的方法。 这种称为AgI-PrI的方法意味着在农杆菌浸润后从植物组织中提取原生质体。 所提出的方法结合了两种广泛使用的用于植物中瞬时基因表达的方法的优点 - 农杆菌浸润和转分离的原生质体。 AgI-PrI技术可应用于其他植物物种。
【背景】迄今为止，已经开发并广泛使用以下用于植物中基因瞬时表达的技术：农杆菌渗入，植物外植体的生物射弹和使用聚乙二醇或电穿孔转染原生质体。这些方法的有效性已被清楚地证明。植物中瞬时表达基因的每种策略以及其益处具有其局限性和缺点，例如由于植物表皮细胞的复杂形状（农杆菌浸润）导致的重组报道蛋白在植物细胞区室中的良好成像困难，低转化效率以及专用设备和辅助材料（用于生物弹）的必要性，以及高活性原生质体产量和有效转染所需的复杂准备程序。这是开发和测试用于在植物细胞中瞬时表达基因的新方法的原因，优选通过改进实验方案并保留研究结果的生理意义。由于蛋白质在包括植物在内的活生物体中的细胞定位与它们的功能密切相关，活细胞中蛋白质的良好可视化成为评估蛋白质功能的重要工具。
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| Establishing a Symbiotic Interface between Cultured Ectomycorrhizal Fungi and Plants to Follow Fungal Phosphate Metabolism
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Author:
Date:
2017-10-20
[Abstract] In ectomycorrhizal plants, the fungal cells colonize the roots of their host plant to create new organs called ectomycorrhizae. In these new organs, the fungal cells colonize the walls of the cortical cells, bathing in the same apoplasm as the plant cells in a space named the ‘Hartig net’, where exchanges between the two partners take place. Finally, the efficiency of ectomycorrhizal fungi to improve the phosphorus nutrition of their host plants will depend on the regulation of phosphate transfer from the fungal cells to plant cells in the Hartig net through as yet unknown mechanisms. In order to investigate these mechanisms, we developed an in vitro experimental device mimicking the common apoplasm of the ectomycorrhizae (the Hartig net) to study the phosphorus metabolism in the ...
[摘要] 在外生菌根植物中，真菌细胞定植于其宿主植物的根部，以产生称为外生菌根的新器官。在这些新器官中，真菌细胞定居在皮质细胞的壁上，与称为“Hartig网”的空间中的植物细胞在同一质粒中沐浴，两地之间的交流发生。最后，外源菌根真菌提高其宿主植物的磷营养的效率将取决于通过尚未知的机制调节从真菌细胞到Hartig网中植物细胞的磷酸转移。为了研究这些机制，我们开发了一种体外实验装置，模拟外生菌根（Hartig网）的常见质粒来研究外生菌根真菌中的磷代谢。 当真菌细胞与寄主植物“Pinus pinaster”的植物细胞相关联时。该装置可用于监测从先前与 32 P-正磷酸盐一起培养的真菌的磷酸盐外排。
【背景】已知菌根真菌和植物之间的关联可以改善植物P营养（由Smith和Read，2008; Plassard和Dell，2010; Cairney，2011; ...
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