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Author:
Date:
2017-08-20
[Abstract] Membrane damage is a hallmark of both biotic and abiotic stress responses. The membrane determines the ability of a cell to sustain altered environmental conditions and hence can be used as a biomarker to assess stress-induced cell damage or death. We present an easy, quick, cost-effective, staining and spectrophotometric method to assess membrane stability of plant cells. In this method, Evan’s blue, an azo dye, is used to assay for cell viability. More specifically, Evan’s blue dye can penetrate through ruptured or destabilized membranes and stain cells. Thus, when plant cells are subjected to stress that compromises membrane integrity, the number of cells that are permeated by Evan’s blue dye will be increased compared to control cells that are not stressed. In contrast, live, healthy ...
[摘要] 膜损伤是生物和非生物胁迫反应的标志。膜决定细胞维持改变的环境条件的能力，因此可以用作生物标志物来评估应激诱导的细胞损伤或死亡。我们提出了一种简单，快速，经济有效的染色和分光光度法来评估植物细胞的膜稳定性。在这种方法中，Evan的蓝色偶氮染料被用于测定细胞活力。更具体地说，Evan的蓝色染料可以穿透破裂或不稳定的膜并染色细胞。因此，当植物细胞受到影响膜完整性的应激时，与不受应激的对照细胞相比，Evan蓝染料渗透的细胞数将增加。相比之下，能够保持膜完整性的活的健康细胞不会吸收Evan的蓝色染料。摄取Evan蓝色染料的细胞会积累蓝色原生质染料，这些染色的细胞可以在有或没有使用相机的明视野显微镜下进行定性记录。此外，染料可以从被Evan的蓝色染料染色的细胞中提取，并且可以通过分光光度法进行定量。使用这种分析，染色阳性染色细胞中染料的积累与细胞膜损伤的程度相关，因此在各种条件下用Evan蓝色染料染色的细胞数量可用作细胞应激的指标。
【背景】植物是暴露于各种紧张因素的固着生物。膜由脂质和糖蛋白组成，作为物理保护屏障。当细胞暴露于诸如热的应力时，细胞膜的流动性被改变。氧化应激会破坏细胞膜。与氧化应激相关的活性氧（ROS）可以作用于膜脂质以降低膜的稳定性。评估膜稳定性的一个已建立的方案，称为沙利文方法，量化了膜中电解质渗漏的程度（Sullivan和Ross，1979）。这种方法是耗时的，繁琐的，涉及几个步骤。另外，由于该方法通常需要将组织暴露于高温（初始电解质泄漏和在高温沸腾后的最终电解质泄漏），所以该方法不能用于评估暴露于应力的植物中对膜的瞬时损伤。我们调整了一种可靠的Evan蓝染色技术，被许多研究人员用于评估细胞死亡或膜损伤（Smith等，1982; ...
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Date:
2016-12-20
[Abstract] Superoxide ions (O2-) and hydrogen peroxide (H2O2) are the reactive oxygen species (ROS) that play a significant role in regulation of many plant processes. The level of O2- ions is determined qualitatively using nitrobluetetrazolium (NBT) assay while the H2O2 is qualitatively estimated using 3,3-diaminobenzidine (DAB) and 2’,7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCFDA) assay. Further the aqueous content of H2O2 is estimated quantitatively using ferrous oxidation-xylenol orange (FOX) assay.
[摘要] 超氧化物离子（O 2 - ）和过氧化氢（H 2 O 2 O 2）是起重要作用的活性氧（ROS）在许多植物过程的调节。使用硝基四氮唑（NBT）测定定性地测定O 2 - 离子的水平，同时使用3,3 - 二氨基联苯胺（DAB）和2'，7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（H 2 N 2 DCFDA）测定。此外，使用亚铁氧化 - 二甲苯酚橙（FOX）测定定量地估计H 2 O 2 O 2的含水量。
背景 超氧化物离子和过氧化氢是在许多情况下起主要作用的活性氧分子涉及植物生长发育的过程包括非生物胁迫耐受性。为了更好地了解ROS对这些过程的调节，对不同类型ROS的定性和定量估计具有重要意义。通过由NADPH氧化酶系统介导的电子从NADPH转移到氧（O 2），产生O 2。使用NBT测定法在水稻幼苗中估计这些离子，其基于通过O将黄色NBT还原成深蓝色不溶性甲the的原理（Kaur等人，2016）。
＆nbsp; H 2是另一种作为调节不同植物过程的重要信号分子的活性氧分子。在使用DAB和H 2 DCFDA测定的水稻幼苗中定性地估计H 2 O 2 O 2的含量（Kaur等人，2016）。 DAB测定是基于DAB与H 2 O 2 O 2的反应形成深棕色聚合产物的原理，而H 2 N 2 ...
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