| Crude Preparation of Lipopolysaccharide from Helicobacter pylori for Silver Staining and Western Blot
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Author:
Date:
2017-10-20
[Abstract] This protocol provides an easy and rapid method to prepare lipopolysaccharide from the gastric pathogen Helicobacter pylori for visualization on acrylamide gels by silver staining and for detecting the presence of Lewis antigens by Western blot. The silver staining is a four-step procedure, involving a 20 min-oxidation step, a 10 min-silver staining step, a 2-10 min color development step and finally a 1-min color termination step. Lipopolysaccharide from H. pylori wild-type and corresponding mutants analyzed by this method are described in a recent publication (Li et al., 2017). This crude preparation of LPS for silver staining is also applicable in other Gram-negative bacteria.
[摘要] 该方案提供了一种从胃病原幽门螺杆菌制备脂多糖的简便快速方法，用于通过银染显示丙烯酰胺凝胶，并通过Western印迹检测Lewis抗原的存在。 银染是四步法，包括20分钟氧化步骤，10分钟银染色步骤，2-10分钟显色步骤，最后是1分钟颜色终止步骤。 来自H的脂多糖。 在最近的出版物（Li等人，2017）中描述了通过该方法分析的野生型和相应的突变体的幽门螺杆菌。 这种用于银染的LPS的粗制剂也适用于其他革兰氏阴性细菌。
【背景】脂多糖（LPS）是一种大而可变的复合糖脂，其组成了大多数革兰氏阴性细菌外膜的外叶。 它通常由三个结构域组成：称为脂质A（或内毒素）的疏水结构域，其嵌入外膜中; 相对保守的非重复核 - 低聚糖; 和从细胞延伸到外部环境的可变O-抗原。 H的独特功能。 幽门螺杆菌脂多糖O抗原是模拟人Lewis抗原的岩藻糖基化寡糖结构的存在。 从革兰氏阴性细菌大规模提取高纯度的LPS是劳动密集型和耗时的。 在这里，在这个协议中，我们详细地描述了使用来自胃病原幽门螺杆菌的容易和快速的粗制备制剂用于通过银染和Lewis抗原通过蛋白质印迹进行表达。
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| Xanthomonas oryzae pv. oryzae Inoculation and Growth Rate on Rice by Leaf Clipping Method
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Author:
Date:
2017-10-05
[Abstract] Bacterial blight caused by Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) is one of the most serious bacterial diseases and a major impediment to the increase of rice yield. Appropriate methods for inoculation of Xoo and disease scoring are necessary to investigate the nature of the disease and the mechanism of plant resistance to the pathogen. As the most-widely grown crop in the worldwide, rice yield plays an important role in food security. Uncovering mechanisms of plant-pathogen interaction of rice and Xoo will help develop rice plants that are more resistant to disease caused by Xoo. Here we describe our validated and efficient methods for inoculation of Xoo and disease scoring.
[摘要] 由黄单胞菌（Xanthomonas oryzae）引起的细菌性病害pv。 Xoo ）是最严重的细菌性疾病之一，也是水稻产量增加的主要障碍。 用于接种“Xoo”和疾病评分的适当方法对于调查疾病的性质和植物对病原体的抗性的机制是必要的。 作为世界上种植最广泛的作物，水稻产量在粮食安全方面发挥重要作用。 水稻和Xoo的植物 - 病原体相互作用的揭示机制将有助于开发更易抵抗Xoo 引起的疾病的水稻植物。 在这里，我们描述了我们验证和有效的接种Xoo 和疾病评分的方法。
【背景】细菌性疾病是以黄单胞菌（Xanthomonas oryzae）/ pv。 （Xoo ）侵入稻叶通过伤口，叶尖和边缘的开放和水平方向（Niño-Liu等人，2006） ）。在下层表皮的细胞间隙中增殖后，Xoo 通过木质部进入并传播到水稻植物中，导致长而灰白色的不透明坏死病变。病变长度和细菌生长率可以作为疾病进展的量度（Mew，1984;Niño-Liu等，2006）。适当的人工接种方法和疾病发生的评估对于调查疾病的性质和防治病原体的植物策略是必要的。 Mew（1984）简要总结了几种人造Xoo 接种方法，包括针刺，喷洒和叶片剪切，或用细菌悬浮液浸渍水稻的非叶片部分。叶片剪切方法最初是由Kauffman等人（1973）开发的，其使横切静脉暴露于Xoo 悬浮液，通过用Xoo切断叶片尖端， ...
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| Scanning Electron Microscope (SEM) Imaging to Determine Inflorescence Initiation and Development in Olive
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Author:
Date:
2017-10-05
[Abstract] Here we present a protocol that describes how to image the structure of the olive axillary bud meristem with a scanning electron microscope (SEM) in order to characterize its identity and developmental stage. Briefly, the specimen is fixed with glutaraldehyde, saturated with ethanol, dried in a critical point dryer (CPD) system, dissected, coated with a conducting material and imaged with a scanning electron microscopy (SEM).
[摘要] 在这里，我们提出一个协议，描述如何使用扫描电子显微镜（SEM）图像橄榄腋芽分生组织的结构，以表征其身份和发育阶段。 简言之，将样品用戊二醛固定，用乙醇饱和，在临界点干燥器（CPD）系统中干燥，解剖，用导电材料涂覆并用扫描电子显微镜（SEM）成像。
【背景】橄榄（Olea europaea）中开花诱导和花序开始的确切时间是争议的（Haberman等人，2017）。 在橄榄中，花序在冬季结束时从侧芽出现，春季开花。 我们制定了一个协议，通过在一年中的不同时间用SEM对橄榄芽中的分生组织进行成像，更好地表征橄榄花序开始的时间。 在这些SEM图像中，可以明确地确定分生组织结构，并且分生组织的定义水平可以高于以前研究中呈现的芽分生组织部分的图像。
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