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Microdrill 78001

Microdrill

Company: RWD Life Science
Catalog#: 78001
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Protocols to Study Declarative Memory Formation in Mice and Humans: Optogenetics and Translational Behavioral Approaches
Author:
Date:
2018-06-20
[Abstract]  Declarative memory formation depends on the hippocampus and declines in aging. Two functions of the hippocampus, temporal binding and relational organization (Rawlins and Tsaltas, 1983; Eichenbaum et al., 1992; Cohen et al., 1997), are known to decline in aging (Leal and Yassa, 2015). However, in the literature distinct procedures have been used to study these two functions. Here, we describe the experimental procedures used to investigate how these two processes are related in the formation of declarative memory and how they are compromised in aging (Sellami et al., 2017). First, we studied temporal binding using a one-trial learning procedure: trace fear conditioning. It is classical Pavlovian conditioning requiring temporal binding since a brief temporal gap ... [摘要]  陈述性记忆的形成取决于海马体和老化程度的下降。已知海马,时间结合和关系组织的两种功能(Rawlins和Tsaltas,1983; Eichenbaum等人,1992; Cohen等人,1997),已知老龄化下降(Leal和Yassa,2015)。但是,在文献中已经使用不同的程序来研究这两个功能。在这里,我们描述了用于研究这两个过程如何与陈述性记忆的形成以及它们如何在衰老中受到损害有关的实验程序(Sellami et。,2017)。首先,我们使用单一试验性学习程序研究了时间绑定:追踪恐惧条件反射。这是经典的巴甫洛夫条件需要时间约束,因为短暂的时间间隔将条件刺激(CS)和无条件刺激(US)呈现分开。我们将追踪恐惧条件程序与光遗传学方法相结合,并且我们表明时间依赖性依赖于背侧(d)CA1活性在时间间隙上的依赖性。然后,我们研究了时间绑定和关系组织之间在声明性记忆形成中的相互作用,这种相互作用使用了小鼠中的两阶段径向迷宫任务及其在人类中的虚拟类比。行为过程包括一个初始学习阶段,在这个阶段中,受试者获得每个手臂持续的奖励/无奖赏价值,然后是测试阶段,其中武器中的奖励突发事件保持不变,但武器重新组合以评估灵活性,陈述性记忆。我们证明了dCA1依赖的时间结合对于记忆的关系组织的发展是必需的,这允许灵活的陈述记忆表达。此外,在衰老过程中,陈述性记忆的退化是由于时间约束能力的减少而阻碍了关系组织。 ...

Glioma Induction by Intracerebral Retrovirus Injection
Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract]  Glioblastoma (GBM) is the most common primary brain cancer in adults and has a poor prognosis. It is characterized by a high degree of cellular infiltration that leads to tumor recurrence, atypical hyperplasia, necrosis, and angiogenesis. Despite aggressive treatment modalities, current therapies are ineffective for GBM. Mouse GBM models not only provide a better understanding in the mechanisms of gliomagenesis, but also facilitate the drug discovery for treating this deadly cancer. A retroviral vector system that expresses PDGFBB (Platelet-derived growth factor BB) and inactivates PTEN (Phosphatase and tensin homolog) and P53 tumor suppressors provides a rapid and efficient induction of glioma in mice with full penetrance. In this protocol, we describe a simple and practical method for ... [摘要]  成胶质细胞瘤(GBM)是成人中最常见的原发性脑癌,预后差。其特征在于高度的细胞浸润,导致肿瘤复发,非典型增生,坏死和血管生成。尽管采取积极的治疗方式,目前的疗法对GBM无效。小鼠GBM模型不仅提供了对胶质瘤发生机制的更好理解,而且有助于药物发现治疗这种致命的癌症。表达PDGFBB(血小板衍生生长因子BB)和灭活PTEN(磷酸酶和张力蛋白同源物)和P53肿瘤抑制因子的逆转录病毒载体系统提供了具有全面外显子的小鼠中胶质瘤的快速和有效的诱导。在该方案中,我们描述了一种简单实用的方法,用于在鼠脑中通过逆转录病毒注射诱导GBM形成。该系统对神经胶质瘤的诱导进行空间和时间控制,并允许用生物发光报告物评估治疗效果。
【背景】胶质母细胞瘤(GBM)是最具侵袭性的恶性脑肿瘤,不幸的是几乎总是致命的。尽管多种治疗方式有进展,但是尚未开发出治疗GBM的有效治疗方法。这种疾病的机制仍然知之甚少。动物模型一直是定义GBM发病机制和基因或药物治疗试验的非常重要的工具。已经开发了几种小鼠模型,其目的是产生尽可能接近模拟人类疾病的疾病,并表现出类似的分子,遗传和组织学特征。突出使用的模型是异种移植(Hingtgen等人,2008)模型,其中人类肿瘤细胞系可以在脑中原位移植以及在免疫受损的小鼠的皮下区域异位移植,提供了具有大肿瘤块在短时间内。遗传工程小鼠模型(GEMM)具有特异性增益的致癌活性或丧失肿瘤抑制通路,其类似于GBM中最频繁失调的通路中的扰动,导致啮齿类动物形成胶质瘤。 ...

Microinjection of Virus into Lumbar Enlargement of Spinal Dorsal Horn in Mice
Author:
Date:
2016-11-20
[Abstract]  In order to explore the role of a specific gene/protein in the specific segment of the spinal cord, the technique of intraspinal injection is particularly used to deliver viral vectors targeting the specific gene/protein. These viral vectors can knockdown or overexpress the specific gene/protein in specific cells (glial cells or neurons). In this protocol, lentivirus containing shRNA for CXCL13 were injected into the dorsal horn of the spinal lumbar enlargement segment (Jiang et al., 2016). This technique allows the study of the role of CXCL13 in the ipsilateral dorsal horn in neuropathic pain without affecting DRG or contralateral dorsal horn. [摘要]  为了探索特定基因/蛋白质在脊髓特定节段中的作用,脊柱内注射技术特别用于递送靶向特定基因/蛋白质的病毒载体。这些病毒载体可以敲低或过表达特定细胞(神经胶质细胞或神经元)中的特定基因/蛋白。在该协议中,将包含用于CXCL13的shRNA的慢病毒注射到脊柱腰扩大节的背角中(Jiang等人,2016)。这种技术允许研究CXCL13在同侧背角中在神经性疼痛中的作用,而不影响DRG或对侧背角。

[背景] 脊髓背角是一种组织良好和分层的神经元复合体,其将来自身体表面和深部组织的感觉信息传输到大脑。脊髓背角神经元的活动可以通过原始传入,下行纤维以及脊髓神经胶质细胞如星形胶质细胞和小胶质细胞来调节。了解如何脊髓神经元或神经胶质细胞中的特定蛋白质和基因有助于生理和病理性疼痛的机制越来越感兴趣。为了探索特定基因/蛋白质在脊髓中的作用,鞘内注射的技术通常用于递送激动剂,拮抗剂,siRNA或miRNA进入蛛网膜下腔。特定基因的敲除和条件缺失是另一种详尽且昂贵的方法。然而,这些方法的限制是缺乏脊髓节段和细胞类型特异性删除或过表达。这个协议表明脊柱内注射可以传递特定的病毒载体到特定的节段脊髓背角,调查基因的功能区域和细胞类型特定的方式。

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