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BENCHTOP CENTRIFUGE

BENCHTOP CENTRIFUGE

Company: Hettich Instruments
Catalog#: Universal 320R
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Preparation of Primary Astrocyte Culture Derived from Human Glioblastoma Multiforme Specimen
Author:
Date:
2017-04-20
[Abstract]  Glioblastoma multiforme (GBM) is a grade 4 astrocytoma tumor in central nervous system. Astrocytes can be isolated from human GBM. Study of astrocytes can provide insights about the formation, progression and recurrence of glioblastoma. For using isolated astrocytes, new studies can be designed in the fields of pharmacology, neuroscience and neurosurgery for glioblastoma treatment. This protocol describes the details for preparing high purity primary astrocytes from human GBM. Tumor tissue is disrupted using mechanical dissociation and chemical digestion in this protocol. 2 weeks after plating the cell suspension in culture, primary astrocytes are available for further subculturing and immunocytochemistry of S100-beta antigen. [摘要]  多形性葡萄球菌(GBM)是中枢神经系统中的4级星形细胞瘤。星形胶质细胞可以从人类GBM中分离出来。研究星形胶质细胞可以提供关于胶质母细胞瘤的形成,进展和复发的见解。对于使用孤立的星形胶质细胞,可以在药理学,神经科学和神经外科学领域设计新的研究用于成胶质细胞瘤治疗。该方案描述了从人类GBM制备高纯度原发性星形胶质细胞的细节。在本方案中使用机械解离和化学消化破坏肿瘤组织。培养细胞悬液2周后,初级星形胶质细胞可用于S100-β抗原的进一步传代培养和免疫细胞化学。

星形胶质细胞是提供脑神经元结构和营养支持的神经胶质细胞。星形胶质细胞的细胞周期似乎在星形细胞瘤脑肿瘤中被破坏。世界卫生组织根据恶性肿瘤将星形细胞分为四级。多形性成胶质细胞瘤(GBM,IV级)是星形细胞瘤最恶性的形式。成胶质细胞瘤的特征在于具有快速增殖速率和血管生成的侵袭性细胞。胶质母细胞瘤患者预后差。目前的治疗方法,包括手术,化学治疗和放射治疗对患者的治疗没有很好的疗效。患者的中位生存时间大约在治疗后一年(Stuup等人,2005; Wen和Kesari,2008)。许多研究人员专注于评估胶质母细胞瘤细胞的生理功能和凋亡的研究,以便检测更有效的治疗方法。在这里,我们提出了一种从没有成纤维细胞污染的人胶质母细胞瘤标本中分离高纯度原代星形胶质细胞的方法(Hashemi等人,2016)。

Infection of Nicotiana benthamiana Plants with Potato Virus X (PVX)
Author:
Date:
2016-12-20
[Abstract]  Potato Virus X (PVX) is the type member of Potexvirus genus, a group of plant viruses with a positive-strand RNA genome (~6.4 kb). PVX is able to establish compatible infections in Nicotiana benthamiana, a commonly used host in plant virology, leading to mild symptoms, such as chlorotic mosaic and mottling. PVX has been widely used as a viral vector for more than two decades (Chapman et al., 1992; Baulcombe et al., 1995; Aguilar et al., 2015). It provides a feasible means for the systemic expression in plants of heterologous proteins, such as avirulence factors, proteins with pharmacological properties, etc., (Hammond-Kosack et al., 1995; Gleba et al., 2014), and also as a tool to help decipher the function ... [摘要]  马铃薯病毒X(PVX)是Potexvirus属(一组具有正链RNA基因组(〜6.4kb)的植物病毒)的类型成员。 PVX能够在烟草烟草(Nicotiana benthamiana)中建立相容的感染,这是常用于植物病毒学的宿主,导致轻度症状,如褪色马赛克和斑驳。 PVX已经被广泛用作病毒载体二十多年(Chapman等人,1992; Baulcombe等人,1995; Aguilar等人。它为异源蛋白质植物中的全身表达提供了可行的手段,例如无毒性因子,具有药理学性质的蛋白质,等等(Hammond-Kosack等人, 1995; Gleba等人,2014),并且还作为通过病毒诱导的基因沉默(VACS)(Lacomme和Chapman,2008)帮助解释植物中基因功能的工具。摩擦(A)和农用过滤(B)的两种不同的方案,即允许PVX在N中的有效乘法和传播。本文详细描述本文。摩擦方法需要先前感染的液体,并且通过诱导对叶组织的机械损伤来实现感染,从而允许病毒颗粒穿透植物表面。农杆菌过滤需要先前修饰的农杆菌携带并将PVX序列递送到植物细胞中。将土壤杆菌生长直至饱和,并用注射器将其浸入植物组织中建立感染。这两种方法中的任何一种都可以成功应用,选择应主要基于材料和时间的可用性,但建议在使用嵌合病毒时使用农杆菌滤过。

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