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Author:
Date:
2015-01-05
[Abstract] In the vertebrate central nervous system (CNS), different neural precursor populations such as neural stem cells (NSCs), intermediate neurogenic progenitors (INPs) and immature neurons have to migrate from their places of birth to their location of function. Coordinated migration is mediated by direct cell-cell interactions and by extracellular matrix components, chemoattractants as well as repellents. The migration potential of such populations as well as the responsiveness to chemoattractive compounds can be addressed in isolated cells using in vitro migration assays. Here we describe two migration assays, a matrigel migration assay and a Boyden chamber migration assay, which allow the in vitro assessment of neural migration under defined conditions (Ladewig, Koch and ...
[摘要] 在脊椎动物中枢神经系统（CNS）中，不同的神经前体细胞如神经干细胞（NSCs），中间神经源性祖细胞（INPs）和不成熟的神经元必须从他们的出生地迁移到它们的功能位置。配位迁移通过直接的细胞 - 细胞相互作用和细胞外基质组分，化学引诱物以及驱避剂介导。这些群体的迁移潜力以及对化学吸引化合物的反应性可以使用体外迁移测定在分离的细胞中解决。在这里我们描述两个迁移测定，基质胶迁移测定和博伊登室迁移测定，其允许在确定的条件下的神经迁移的体外评估（Ladewig，Koch和Brüstle，2014）。基质胶基质是可溶性基底膜提取物。基质胶基质的主要成分是胶原，层粘连蛋白和蛋白聚糖，它们为迁移细胞提供了底物。在基质胶试验中，可以使用相差显微镜分析迁移。 Boyden室测定法（Richards和McCullough，1984）基于微化学趋化室，其由通过具有限定孔径的膜分开的两个室组成。细胞可以接种在上室中并允许通过孔迁移到下室，其中加载了潜在的趋化剂。可以在固定和免疫组织化学染色后分析细胞迁移。原则上，所描述的方案应该适用于其它细胞群体，例如内皮细胞或癌细胞，使用适合于特定细胞类型的个体需要的条件。
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