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Author:
Date:
2016-12-05
[Abstract] Cell wall is a complex biopolymer on the surface of all Gram-positive bacteria. During infection, cell wall is recognized by the innate immune receptor Toll-like receptor 2 causing intense inflammation and tissue damage. In animal models, cell wall traffics from the blood stream to many organs in the body, including brain, heart, placenta and fetus. This protocol describes how to prepare purified cell wall from Streptococcus pneumoniae, detect its distribution in animal tissues, and study the tissue response using the placenta and fetal brain as examples.
[摘要] 细胞壁是所有革兰氏阳性菌表面上的复杂生物聚合物。在感染期间，细胞壁被先天免疫受体Toll样受体2识别，引起强烈的炎症和组织损伤。在动物模型中，从血流到体内许多器官（包括脑，心脏，胎盘和胎儿）的细胞壁运输。该协议描述了如何从肺炎链球菌制备纯化的细胞壁，检测其在动物组织中的分布，并且使用胎盘和胎脑作为实例研究组织反应。
关键词： 细胞壁，肽聚糖，细菌炎症，神经增殖，胎儿神经发生，胎盘运输，Toll样受体2配体，肺炎链球菌
/strong>宿主对感染的反应涉及许多细菌组分的识别，包括细胞壁（CW），一种形成所有革兰氏阳性细菌表面的复合大分子。革兰氏阳性细菌的CW由肽聚糖和磷壁酸的共价网络形成。肺炎链球菌是肺炎，败血症和脑膜炎的主要原因，已经成为研究对包括CW在内的革兰氏阳性细菌感染的先天免疫反应的重要模式生物体。 当肺炎链球菌（肺炎球菌）感染时，CW成分在生长期或抗生素诱导的死亡期间从细菌释放，它在血流中循环并穿过细胞屏障，包括胎盘和血脑屏障。 CW组分具有等于或大于完整细菌的炎性活性（Tuomanen等人，1985a和1985b）。 ...
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Author:
Date:
2013-06-20
[Abstract] One of the most compelling approaches in the discovery of novel antimicrobials is screening of natural sources. In our publication we report on the activity of a compound 8-hydroxyserrulat-14-en-19-oic acid (EN4), a diterpene isolated from the Australian plant Eremophila neglecta. We evaluate its applicability for treatment of implant-associated infections. A comprehensive analysis of the mechanism of action of EN4 against staphylococci revealed its membranolytic properties and a general inhibition of macromolecular biosynthesis, which was confirmed in a macromolecular biosynthesis assay and suggested a multitarget activity. The method used to investigate an influence of EN4 on the synthesis of peptidoglycan, RNA, DNA and proteins is based on precipitation of macromolecules with ...
[摘要] 在发现新的抗微生物剂中最引人注目的方法之一是筛选天然来源。在我们的出版物中，我们报告了一种化合物8-羟基胆固醇-14-烯-19-酸（EN4）（一种从澳大利亚植物中分离的二萜烯）的活性。我们评估其适用于植入物相关感染的治疗。对EN4对葡萄球菌的作用机制的综合分析揭示其膜分解性质和大分子生物合成的一般抑制，其在大分子生物合成测定中被证实并提出多靶点活性。用于研究EN4对肽聚糖，RNA，DNA和蛋白质的合成的影响的方法是基于大分子与三氯乙酸的沉淀。这些大分子由相应的[3 H] - 标记的前体合成。测量掺入和不掺入抗微生物剂的放射性，并反映测试化合物的作用模式。使用具有已知作用机制的抗生素作为对照。
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