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Agarose, low gelling temperature

琼脂糖,低胶凝温度

Company: Sigma-Aldrich
Catalog#: A9414
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Zebrafish Embryo Xenograft and Metastasis Assay
Author:
Date:
2018-09-20
[Abstract]  Xenograft models, and in particular the mouse xenograft model, where human cancer cells are transplanted into immunocompromised mice, have been used extensively in cancer studies. Although these models have contributed enormously to our understanding of cancer biology, the zebrafish xenograft model offers several advantages over the mouse model. Zebrafish embryos can be easily cultured in large quantities, are small and easy to handle, making it possible to use a high number of embryos for each experimental condition. Young embryos lack an efficient immune system. Therefore the injected cancer cells are not rejected, and the formation of primary tumors and micrometastases is rapid. Transparency of the embryos enables imaging of primary tumors and metastases in an intact and living embryo. ... [摘要]  异种移植模型,特别是小鼠异种移植模型,其中人癌细胞被移植到免疫受损小鼠中,已广泛用于癌症研究。尽管这些模型对我们对癌症生物学的理解做出了巨大贡献,但斑马鱼异种移植模型与鼠标模型相比具有多种优势。斑马鱼胚胎可以很容易地大量培养,体积小且易于处理,因此可以在每种实验条件下使用大量胚胎。年轻的胚胎缺乏有效的免疫系统。因此,注射的癌细胞不被排斥,并且原发性肿瘤和微转移的形成是快速的。胚胎的透明度使得能够在完整和活的胚胎中对原发性肿瘤和转移瘤进行成像。在这里,我们描述了一种方法,其中表达GFP的肿瘤细胞被注射到斑马鱼胚胎的心包空间。在注射后4天,对胚胎成像并分析原发性肿瘤和远端微转移的形成。

【背景】 斑马鱼( Danio rerio )是一种小型淡水鱼,不仅在发育生物学中,而且在生物医学中越来越受欢迎。快速发展的领域之一是使用斑马鱼作为癌症生物学研究的模型。斑马鱼高效可靠地交配,可以产生大量小,透明,外部发育的后代,可以在例如,多孔板中轻松培养(White et al。 >,2013)。有趣的是,人类肿瘤细胞可以植入斑马鱼胚胎中,许多异种移植物能够通过在胚胎中生长,侵入和转移来忠实地重演它们的恶性行为(Lee et al。,2005; Nicoli et al。,2007; Chapman et ...

Polyamine and Paraquat Transport Assays in Arabidopsis Seedling and Callus
Author:
Date:
2017-08-05
[Abstract]  Polyamines (PAs) are polycationic compounds found in all living organisms and play crucial roles in growth and survival. We here show the ‘Polyamine and paraquat (PQ) transport assay’ protocol, which can be used to examine the uptake activity of PA/PQ transporters. We have used this protocol to demonstrate that PUT3 in Arabidopsis is a polyamine transporter and is able to take up spermidine and its analog paraquat. [摘要]  多胺(PA)是在所有生物体中发现的聚阳离子化合物,在生长和生存中起关键作用。 我们在这里展示了“多胺和百草枯(PQ)运输测定”方案,可用于检查PA / PQ转运蛋白的摄取活性。 我们已经使用该协议来证明拟南芥中的PUT3是多胺转运蛋白,并且能够吸收亚精胺及其类似百草枯。
【背景】PA通过与阴离子大分子如DNA,RNA和蛋白质的功能相互作用和调节而参与基因调控。 在活细胞中,必须调节PA的含量以维持细胞止血。 在高等植物中,三种主要的多胺,腐胺(Put),亚精胺(Spd)和精胺(Spm)以游离形式或缀合形式与其他分子一起存在(Gill和Tuteja,2010)。 在酵母中,鉴定了四种质膜多胺转运体DUR3,SAM3,GAP1和AGP2(Uemura等人,2007)。 在拟南芥中,鉴定了5种推定的多胺摄取转运蛋白(PUT1-PUT5),并且PUT1-3已被实验验证为多胺转运蛋白(Mulangi等人,2012; Li et al,2013)。 我们以下所述的方案成功证实了PUT3是多胺和百草枯的流入转运蛋白,并且在Put3突变体(Shen等人,2016)中PQ /Spd吸收受损)。

An Acute Mouse Spinal Cord Slice Preparation for Studying Glial Activation ex vivo
Author:
Date:
2017-01-20
[Abstract]  Pathological conditions such as amyotrophic lateral sclerosis, spinal cord injury and chronic pain are characterized by activation of astrocytes and microglia in spinal cord and have been modeled in rodents. In vivo imaging at cellular level in these animal models is limited due to the spinal cord’s highly myelinated funiculi. The preparation of acute slices may offer an alternative and valuable strategy to collect structural and functional information in vitro from dorsal, lateral and ventral regions of spinal cord. Here, we describe a procedure for preparing acute slices from mouse spinal cord (Garré et al., 2016). This preparation should allow further understanding of how glial cells in spinal cord respond acutely to various inflammatory challenges. [摘要]  病理状况如肌萎缩性侧索硬化,脊髓损伤和慢性疼痛的特征在于脊髓中星形胶质细胞和小胶质细胞的活化,并已在啮齿动物中建模。 在这些动物模型中的细胞水平的体内成像由于脊髓的高度髓鞘化的功能而受到限制。 急性切片的制备可能提供一种替代和有价值的策略,从脊髓的背侧,外侧和腹侧区域体外收集结构和功能信息。 在这里,我们描述了一种从小鼠脊髓制备急性切片的过程(Garréet al。,2016)。 这个准备应该进一步了解脊髓中的神经胶质细胞是如何急剧地反应各种炎症的挑战。
【背景】已经使用小鼠转基因技术来模拟影响脊髓的不同人类病态,其中许多特征为局部胶质激活,神经炎症的一个标志。利用基于激光扫描显微技术的共焦显微镜(White et al。,1987)和双光子显微镜(Denk等,1990),大大提高了对健康和疾病中胶质生物学的认识。 )以无创的方式可视化活体动物中的细胞结构和亚细胞结构域;例如,表达遗传编码的记者或钙传感器的小鼠已被用于分别形成胶质结构(体细胞和过程)并研究钙动力学和信号传导(Davalos等人,2005; ...

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