| Isolation of Ustilago bromivora Strains from Infected Spikelets through Spore Recovery and Germination
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Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract] Ustilago bromivora is a biotrophic smut fungus infecting Brachypodium sp. It is closely related to the barley-infecting smut Ustilago hordei, and related to the well-studied, gall-inducing model pathogen Ustilago maydis. Upon flowering, the spikelets of U. bromivora-infected plants are filled with black fungal spores. While it is possible to directly use this spore material to infect Brachypodium seeds, in many cases it is more useful to isolate individual strains of U. bromivora for a genetically homogenous population. This protocol describes how to collect and germinate the spores of U. bromivora on plate in order to obtain strains derived from a single cell.
[摘要] Ustilago bromivora 是感染Brachypodium sp的生物营养性真菌真菌。 它与大麦感染黑斑病大西洋黑格尔（Hstilago hordei）密切相关，并且与研究良好的胆汁诱导型模型病原体Ustilago maydis有关。 开花时，U的小穗 受感染的植物充满黑色真菌孢子。 虽然可以直接使用这种孢子材料感染种子，但是在许多情况下，分离个体U株更有用。 bromivora 用于遗传上均匀的群体。 该协议描述了如何收集和发芽的U孢子。 溴代，以获得源自单细胞的菌株。
【背景】长期以来，感染玉米的Ustilago maydis已经被确定为用于研究生物营养性病原体的模型系统（Brefort等人，2009）。这导致了关于生物相互作用的性质的许多发现，但由于在实验室中与玉米的实际困难而受到限制。对于感染大麦（Hordeum vulgare ）（Laurie等人，2012）的模型真菌Ustilago hordei也是如此。与这些作物植物相反，模式草（Brachypodium distachyon）具有小的基因组，不成熟的生长条件，并且易于遗传操作（Draper等人，2001）。 B中。 distachyon 也被用于研究非对虾对小麦条锈菌的抗性。 SP。由于其通常的宿主，小麦（An 等人，2016）的遗传复杂性，小麦具有。最近，我们已经描述了Ustilago ...
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| Aldicarb-induced Paralysis Assay to Determine Defects in Synaptic Transmission in Caenorhabditis elegans
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Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract] Aldicarb treatment causes an accumulation of acetylcholine in the synaptic cleft of the neuromuscular junction, resulting in sustained muscle activation and eventually paralysis. Aldicarb-induced paralysis assay is an easy and fast method to determine whether synaptic transmission of a C. elegans mutant of interest is altered. This assay is based on the correlation of the rate of neurotransmitter release with the rate of paralysis. In this protocol, we describe a method for simultaneously assessing the aldicarb sensitivity of animals with different genotypes.
[摘要] 涕灭威的治疗导致神经肌肉接头突触裂缝中的乙酰胆碱积聚，导致持续的肌肉活化并最终导致麻痹。 涕灭威诱导的麻痹测定是确定是否突触传播的一种简单且快速的方法。 线虫兴趣突变体被改变。 该测定是基于神经递质释放速率与麻痹率的相关性。 在该方案中，我们描述了同时评估具有不同基因型的动物的涕灭威敏感性的方法。
【背景】突触传递通过动作电位到达突触前末端而开始，这又导致神经递质的释放。释放的神经递质结合并激活突触后受体（Sudhof，2013）。 ℃。线虫运动由乙酰胆碱释放兴奋性运动神经元和GABA（γ-氨基丁酸）释放抑制运动神经元控制（Richmond和Jorgensen，1999; ...
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| Artificial Optogenetic TRN Stimulation of C. elegans
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Author:
Date:
2016-10-20
[Abstract] Optogenetics is a powerful tool for manipulating neuronal activity with high temporal and spatial precision. In the nematode C. elegans optogentics is especially useful and easy to apply. This is because C. elegans is translucent, so its neurons are highly accessible to optic stimulation. In addition, many of its neurons can be exclusively targeted using cell-specific promoters. We have recently taken advantage of optogenetics to deliver artificial patterns of prolonged activation to a class of mechanosensory neurons, called touch receptor neurons (TRNs) in worms that lack touch sensation due to a genetic mutation. Our aim was to examine whether we can counteract the effects of sensory loss by artificially activating the sensory neurons. Here we describe in detail the ...
[摘要] 光遗传学是一个强大的工具，用于操纵具有高时间和空间精度的神经元活动。在线虫中。 elegans 光兴剂是特别有用和容易应用。这是因为 C。 elegans 是半透明的，所以它的神经元高度可及光学刺激。此外，其许多神经元可以使用细胞特异性启动子专门靶向。我们最近利用光学学提供长时间激活的人工模式到一类机械感觉神经元，称为触摸受体神经元（TRNs）在蠕虫缺乏触摸感觉由于基因突变。我们的目的是检查我们是否可以通过人为激活感觉神经元抵消感觉损失的影响。在这里我们详细描述我们使用的协议的各个组件。这包括暴露蠕虫表示光敏离子通道Channelrohdopsin 2（ChR2）在TRNs长期随机闪光。
[背景] 神经元的人工光遗传刺激（或沉默）已经在神经科学研究中广泛使用。强大的模型生物，C。 （Nagel等人，2005），并且多个组已经开发了用于以高时间和空间精度递送人工简单模式的刺激的一系列技术（Leifer等人，2011; Stirman等人，2011）和与行为结合（Kocabas等人，2012）和钙成像（Guo等人，2009）或电生理学（Lindsay等人，2011）读数。我们有兴趣建立一种长期刺激方案，其将取代被剥夺感觉输入的机械感觉神经元中的自然正在进行的活动（Rabinowitch等人，2016）。我们的协议集成了以前的C。 elegans ...
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