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Dithiothreitol (DTT)

二硫苏糖醇(DTT)

Company: Bio-Rad Laboratories
Catalog#: 1610611
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Non-radioactive LATS in vitro Kinase Assay
Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract]  This protocol describes a method to directly measure LATS activity by an in vitro kinase assay using YAP as a substrate. [摘要]  该方案描述了通过使用YAP作为底物的体外激酶测定直接测量LATS活性的方法。
【背景】大肿瘤抑制剂1/2(LATS1 / 2)是河马途径的蛋白激酶和核心成分,其调节器官大小和组织稳态。 LATS激酶通过其疏水基序上的磷酸化被激活(HM,对于LATS1为Thr 1079,对于LATS2为Thr 1041)。 结果,在HM中识别LATS的抗体抗体的Western印迹提供了评估LATS激酶活性的间接方法(Data analysis,图1)。 此外,活性LATS在Ser 127磷酸化并抑制转录共激活物是相关蛋白(YAP),导致YAP结合到14-3-3和细胞质保留(Zhao等人,2007)。 在LATS体外激酶测定中使用YAP作为底物提供了直接评估LATS激酶活性的方法。 通过该测定,我们能够显示血清饥饿和山梨醇诱导的渗透激活LATS(Yu等人,2012; Hong等人,2017)和进一步的 导致YAP Ser 127磷酸化(数据分析,图2)。

RhoGTPase Activation Assay
Author:
Date:
2012-10-05
[Abstract]  This protocol describes procedures to assay for GTP-bound (active) form of small GTPases of the Rho superfamily in human brain cancer (glioma) cell lines but can also be applied to cells or tissues of other origins. The principle of assay is based on the property of these active GTPases to interact with their specific effectors (e.g. Rhotekin for RhoA; p21-activated kinase (PAK) for Rac1 and Cdc42. In essence, Rhotekin or PAK1 are expressed in the form of GST-fusion protein to pull down the corresponding active GTPases. [摘要]  属于黄病毒科的JEV( 病毒)与CLEC5A(C型凝集素结构域家族5,成员A) C型凝集素,与DAP12信号传导蛋白相关并且在骨髓细胞上表达,与登革热病毒的程度相同。 该方案用于通过ELISA方法进行和确定纯化的JEV颗粒与人和鼠CLEC5A.Fc融合蛋白之间的相互作用。 不同的菌株和批次的纯化JEV以及CLEC5A.Fc融合蛋白的纯度可能影响吸光度的结果。 如果用户打算进行ELISA测定,则很可能需要修饰。...

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