| Embryonic Intravitreous Injection in Mouse
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Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract] Axons of retinal ganglion cells (RGCs) relay visual information from the retina to lateral geniculate nucleus (LGN) and superior colliculus (SC), which are two major image-forming visual nuclei. Wiring of these retinal projections completes before vision begins. However, there are few studies on retinal axons at embryonic stage due to technical difficulty. We developed a method of embryonic intravitreous injection of dyes in mice to visualize retinal projections to LGN and SC. This study opens up the possibility of understanding early visual circuit wiring in mice embryos.
[摘要] 视网膜神经节细胞（RGC）的轴突将视觉信息从视网膜传递到外侧膝状核（LGN）和上丘（SC），这是两个主要的成像视觉核。 在视力开始之前完成这些视网膜投射的布线。 然而，由于技术困难，很少有关于胚胎期视网膜轴突的研究。 我们开发了一种胚胎玻璃体内注射染料的方法，用于观察LGN和SC的视网膜投射。 这项研究开辟了理解小鼠胚胎早期视觉电路布线的可能性。
【背景】早在胚胎第14.5天（E14.5）小鼠中，视网膜轴突开始向LGN和SC投射。 为了研究胚胎中的轴突投射，需要在注射手术前保持胚胎存活至少10小时，玻璃内注射染料。 以前的研究表明，胚胎可以使用含氧小鼠血清进行体外培养。 然而，营养多样性，氧饱和度和温度调节等问题会影响胚胎的生理状况。 在我们的研究中，我们通过胚胎中的子宫壁和眼睑进行玻璃体内注射，并在注射后将它们保存在子宫中。 从E15.5到E18.5很好地标记了对LGN和SC的视网膜轴突投射。
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| Preparation of Teased Nerve Fibers from Rat Sciatic Nerve
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Author:
Date:
2017-10-05
[Abstract] Compared to tissue sectioning techniques, the technique of teasing single nerve fibers provides a better way to understand the structures of myelin sheaths and axons of the peripheral myelinated nerves. This protocol describes a method for preparation of teased single nerve fibers from rat sciatic nerve. In this protocol, fixed nerves are teased into single individual fibers and arranged onto adhesion microscope slides for further immuno-staining.
[摘要] 与组织切片技术相比，单神经纤维的技术提供了更好的方法来了解髓鞘和外周髓鞘神经的轴突的结构。 该方案描述了一种从大鼠坐骨神经制备调节的单神经纤维的方法。 在该方案中，将固定的神经梳理成单个单独的纤维并排列在粘附显微镜载玻片上用于进一步的免疫染色。
【背景】外周神经系统中的雪旺氏细胞围绕轴突包裹以形成绝缘髓鞘，其允许动作电位的快速传导。 显着的多层髓鞘由精细的结构组成，包括紧密的鞘，施密特 - 兰特曼切口，Cajal带，内外侧mesaxons，以及在paranodal区域的结构。 为了阐明外周神经有髓纤维的正常和异常结构，需要使用切割的神经纤维。 拔牙纤维的方法已被广泛应用于人类和啮齿类动物周围神经的研究。 在这个协议中，我们描述了一种将周围神经分为单纤维的方法，用于对周围神经的轴突或髓鞘进行进一步的形态学研究。
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| Aorta Ring Assay
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Author:
Date:
2016-07-05
[Abstract] Angiogenesis is the nature and pathological process of blood vessel growth from pre-existing vascular buds. It plays an important role in cancer and cardiovascular disease. The aorta ring assay is an approach to study angiogenesis. In this experiment, we used the aorta of rat as the study material, cleaned the surrounding tissue of aorta and cut it into 1 mm long rings. Next, the rings were cultured in growth factor-reduced matrigel polymerized at 37 °C. Angiogenesis was assessed at 7 days by using an inverted microscope platform.
[摘要] 血管生成是来自预先存在的血管芽的血管生长的性质和病理过程。 它在癌症和心血管疾病中起重要作用。 主动脉环测定是血管生成的一种方法。 在这个实验中，我们使用大鼠主动脉作为材料，清洁主动脉的周围组织，并将其切成1 mm长的环。 然后将环在37℃下聚合的生长因子减少的基质胶中培养。 通过使用倒置显微镜平台在7天评估血管发生。
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