{{'Search' | translate}}
 

Fetal Bovine Serum

胎牛血清

Company: Thermo Fisher Scientific
Catalog#: 10099141
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

In vitro Osteoclastogenesis Assays Using Primary Mouse Bone Marrow Cells
Author:
Date:
2018-06-05
[Abstract]  Osteoclasts are a group of bone-absorbing cells to degenerate bone matrix and play pivotal roles in bone growth and homeostasis. The unbalanced induction of osteoclast differentiation (osteoclastogenesis) in pathological conditions, such as osteoporosis, arthritis and skeleton metastasis of cancer, causes great pain, bone fracture, hypercalcemia or even death to patients. In vitro osteoclastogenesis analysis is useful to better understand osteoclast formation in physiological and pathological conditions. Here we summarized an easy-to-follow osteoclastogenesis protocol, which is suitable to evaluate the effect of different factors (cytokines, small molecular chemicals and conditioned medium from cell culture) on osteoclast differentiation using primary murine bone marrow cells. [摘要]  破骨细胞是一组骨吸收细胞,用于退化骨基质并在骨生长和体内平衡中发挥关键作用。 在诸如骨质疏松症,关节炎和癌症骨骼转移等病理状态下破骨细胞分化(破骨细胞生成)的不平衡诱导会导致严重疼痛,骨折,高钙血症或甚至导致患者死亡。 体外破骨细胞生成分析对于更好地理解生理和病理条件下的破骨细胞形成是有用的。 在这里,我们总结了一种易于遵循的破骨细胞生成方案,其适用于评估不同因素(细胞因子,小分子化学物质和来自细胞培养物的条件培养基)对使用原代鼠骨髓细胞的破骨细胞分化的影响。

【背景】骨骼在生命周期内通过连续且良好控制的吸光度和骨量形成来维持。在骨腔中,这两种活性中的每一种都是通过特定的细胞类型进行的:骨形成性成骨细胞和骨降解性破骨细胞。成骨细胞和破骨细胞分别来自骨驻留间充质细胞和造血谱系祖细胞。造血系统骨髓祖细胞分化为成熟破骨细胞主要受核因子-κB配体受体激活因子(RANKL,由TNFSF11编码)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF,由< )来自成骨细胞及其祖细胞(suda et al。 ,1999)。与其他细胞不同,破骨细胞通过融合一定数量的祖细胞而分化(boyle等人,2003)。因此,成熟破骨细胞的关键组织学特征是它们的多个核。成熟后,破骨细胞能够通过产生酸化的微环境来溶解主要由磷酸钙组成的骨质以及蛋白酶以降解细胞外基质(boyle等人,2003),从而能够骨吸收。溶解的骨基质释放成骨细胞使用的隔离生长因子以扩大其人群(kassem和bianco,2015)。成骨细胞和破骨细胞之间的这种相互作用确保了协调的骨形成和 - 退化活性,其在包括骨质疏松症,关节炎和癌症骨转移的过多疾病中失调(rodan和martin,2000; raisz,2005; gupta和massague ,2006)。根据之前的文献(lu等人,2009; wang等人,2014; zhuang等人,2017),在此我们描述使用原代鼠骨髓细胞进行体外破骨细胞发生试验的逐步方案,其允许研究广泛范围的因子/条件(例如细胞因子和条件培养基)对破骨细胞的影响分化。 )来自成骨细胞及其祖细胞(suda="" et="" al。="" ,1999)。与其他细胞不同,破骨细胞通过融合一定数量的祖细胞而分化(boyle等人,2003)。因此,成熟破骨细胞的关键组织学特征是它们的多个核。成熟后,破骨细胞能够通过产生酸化的微环境来溶解主要由磷酸钙组成的骨质以及蛋白酶以降解细胞外基质(boyle等人,2003),从而能够骨吸收。溶解的骨基质释放成骨细胞使用的隔离生长因子以扩大其人群(kassem和bianco,2015)。成骨细胞和破骨细胞之间的这种相互作用确保了协调的骨形成和="" -="" 退化活性,其在包括骨质疏松症,关节炎和癌症骨转移的过多疾病中失调(rodan和martin,2000;="" raisz,2005;="" gupta和massague="" ,2006)。根据之前的文献(lu等人,2009;="" wang等人,2014;=""> ...

Isolation and Analysis of Stromal Cell Populations from Mouse Lymph Nodes
Author:
Date:
2017-08-20
[Abstract]  Our protocol describes a simple procedure for isolating stromal cells from lymph nodes (LN). LN are disrupted then enzymatically digested with collagenase and dispase to produce a single cell suspension that can be stained with fluorescently labelled antibodies and analysed by flow cytometry. This protocol will enable identification of fibroblastic reticular cells (FRC), lymphatic endothelial cells (LEC), blood endothelial cells (BEC) as PNAd+ BEC that form LN high endothelial venules (HEV). This method can be applied to examine LN stromal cell responses during inflammatory events induced by infections or immunologic adjuvants and to subset most leukocytes found in LN. [摘要]  我们的方案描述了从淋巴结(LN)分离基质细胞的简单过程。 LN被破坏,然后用胶原酶和分散酶酶消化以产生可以用荧光标记的抗体染色的单细胞悬浮液并通过流式细胞术分析。 该方案能够识别形成LN高内皮小静脉(HEV)的PNAd + BEC的成纤维细胞网状细胞(FRC),淋巴内皮细胞(LEC),血液内皮细胞(BEC)。 该方法可以用于检测由感染或免疫佐剂诱导的炎症事件期间的LN基质细胞反应,并且在LN中发现大多数白细胞。
【背景】淋巴结(LN)由间充质和内皮基质细胞的复杂网络构成。这些包括成纤维细胞网状细胞(FRCs),淋巴内皮细胞(LECs)和血液内皮细胞(BECs)。这些基质细胞组织了LN的复杂微结构,使得能够支持免疫细胞迁移,体内平衡,耐受性和细胞相互作用,以引发对病原体和肿瘤的免疫应答。我们已经表明,LN基质细胞可以响应于炎症信号而增殖和扩张,并且将免疫细胞募集到伴随感染的LN中(Gregory等,2017)。这些基质细胞也可以显着调节其转录程序以应对感染,从而支持持续的免疫应答。该方案使稳定状态和疾病期间LN的基质细胞亚群可靠地分离。这使得LN基质细胞的表型,功能,遗传或表观遗传学研究揭示了它们如何有助于组织体内平衡和免疫应答。

Tumorigenicity Assay in Nude Mice
Author:
Date:
2017-07-05
[Abstract]  Tumorigenicity refers to the ability of cultured cells to develop viable tumors in immune-deficient animals. The goal of this protocol is to illustrate tumorigenicity assay by subcutaneous tumor-cell-transplantation in nude mice. Target cells are transplanted to 6-week-old nude mice subcutaneously and the tumor growth is monitored over a period of observation or treatment. When tumor grows to a pre-determined size or by the end of the limited period, the nude mice will be euthanatized and the xenograft will be removed for further examination. [摘要]  致瘤性是指培养的细胞在免疫缺陷型动物中发展活肿瘤的能力。 该方案的目的是通过裸鼠皮下肿瘤细胞移植来说明致瘤性测定。 将靶细胞皮下移植到6周龄的裸鼠中,并在观察或治疗期间监测肿瘤生长。 当肿瘤生长至预定大小或在有限期结束时,裸鼠将被安乐死,异种移植物将被去除以进一步检查。
【背景】肿瘤发病率高,死亡率高,是导致死亡的主要原因之一,也是一个重大的公共卫生问题。 每年进行广泛的研究,以探索肿瘤发病机制和抗肿瘤治疗。 在癌症研究的过程中,裸鼠中的致瘤性测定是用于监测体内肿瘤生长的广泛使用的实验(Giovanella et al。,1974)。 用于致瘤性测定的最常用的动物系统是无胸腺裸鼠(Petricciani等人,1973),其中恶性细胞可以皮下或肾下 - 荚膜移植(van Meir,1997)。 对于具有相对低致瘤性能力的细胞,通过照射(30-60Gy)或植入Matrigel(Pretlow等人,1991)可以提高摄取率。 致瘤性测定提供了产生人细胞衍生的肿瘤组织用于测量肿瘤细胞恶性肿瘤和评价抗肿瘤药物功效的方法。

Comments