| A Murine Orthotopic Allograft to Model Prostate Cancer Growth and Metastasis
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Author:
Date:
2017-02-20
[Abstract] Prostate cancer is one of the most common cancers in men in the United States. Comprehensive understanding of the biology contributing to prostate cancer will have important clinical implications. Animal models have greatly impacted our knowledge of disease and will continue to be a valuable resource for future studies. Herein, we describe a detailed protocol for the orthotopic engraftment of a murine prostate cancer cell line (Myc-CaP) into the anterior prostate of an immune competent mouse.
[摘要] 前列腺癌是美国男性最常见的癌症之一。对前列腺癌生物学的全面了解将具有重要的临床意义。动物模型大大影响了我们对疾病的了解，并将继续成为未来研究的宝贵资源。在这里，我们描述了将一种鼠前列腺癌细胞系（Myc-CaP）原位植入免疫能力小鼠前列腺的详细方案。
背景 由于转移的癌症的一小部分，前列腺癌是男性癌症死亡的主要原因。然而，驱动局部肿瘤发展和进展为转移性疾病的遗传和分子因素仍未完全了解。基因工程小鼠（GEM）模型和前列腺癌的异种移植模型都有助于我们对前列腺癌遗传学的了解（Ittmann等人，2013; Park等人，2010）。通过前列腺特异性转基因过表达如Hi-Myc小鼠（Ellwood-Yen等人，2003）或通过前列腺特异性缺失例如在Pten中的遗传操作， - 小鼠（Wang等人，2003）是有利的，因为它模拟了免疫能力小鼠的器官微环境中的肿瘤发展和进展。转移性前列腺癌的发展在这些GEM模型中是可变的，其中一些低频率, 其他模型如TRAMP（转基因腺癌小鼠前列腺）（reenberg等，1995）和Hi-Myc / Pten < -=""> （Hubbard等人，2016）。尽管他们对前列腺癌研究有很大的实用价值，但进一步的遗传操纵GEM模型是困难，耗时和昂贵的。为了克服这些局限性，研究人员依赖于人类细胞系的皮下和原位异种移植物。细胞系可以以多种方式在体外进行遗传操作。虽然皮下异种移植物由于其易于注射和监测而是有利的，但原位异种移植物更好地概括了可能影响药物敏感性的局部肿瘤微环境（Wilmann等人，1992; ...
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| Transplantation of Mesenchymal Cells Including the Blastema in Regenerating Zebrafish Fin
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Author:
Date:
2017-01-20
[Abstract] Regeneration of fish fins and urodele limbs occurs via formation of the blastema, which is a mass of mesenchymal cells formed at the amputated site and is essential for regeneration. The blastema transplantation, a novel technique developed in our previous studies (Shibata et al., 2016; Yoshinari et al., 2012) is a useful approach for tracking and manipulating the blastema cells during fish fin regeneration.
[摘要] 鱼鳍和尿le肢的再生通过形成大气泡，其是在截肢位点处形成的质量的间充质细胞并且对于再生是必需的。胚胎移植是我们以前研究（Shibata等人，2016; Yoshinari等人，2012）开发的一种新技术，是一种有用的方法，用于跟踪和操纵鱼翅再生期间的blastema细胞。
背景在诸如鱼，两栖动物和哺乳动物之类的动物模型的早期胚胎阶段常规进行细胞移植研究，但将移植细胞靶向特定组织是困难的。在我们的研究中开发的Blastema移植是将间充质供体细胞引入宿主翅片射线的有效方法。它使我们能够在鱼翅再生期间跟踪细胞命运和/或操纵细胞信号，如成纤维细胞生长因子（Fgf）。实际上，在我们最近出版的作品中，我们将携带hsp701：显性负性fgf受体和β-肌动蛋白：dsRed2转基因的blastema细胞移植到野生型类型blastema区域并且在鳍状线间充质细胞的子集（Shibata等人，2016）中马齿抑制Fgf信号传导。该方法适用于分析其他细胞信号和通过活细胞成像跟踪细胞命运。
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| Adoptive Transfer of Tumor Expanded Regulatory T Cells (Tregs)
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Author:
Date:
2016-08-20
[Abstract] Regulatory T cells (Tregs), a subset of CD4+CD25+ T cells, infiltrate tumors and suppress antitumor activity of effector T and NK cells. Depletion of Tregs by anti CD25+ antibodies has been shown to reduce tumor growth and metastasis (Olkhanud et al., 2009). Conversely, adoptive transfer of Tregs induced immune suppression and promoted tumor growth (Smyth et al., 2006; Janakiram et al., 2015). We have adoptively transferred Tregs to evaluate their immunosuppressive function in vivo. Our study (Vences-Catalan et al., 2015) compared the immunosuppressive efficacy of Tregs derived from tumor-bearing wild type to those of CD81KO mice. The following protocol could be adapted to any other source of Tregs.
Lymph ...
[摘要] 调节性T细胞（Treg）（CD4 + CD25 + T细胞的子集）浸润肿瘤并抑制效应T和NK细胞的抗肿瘤活性。已显示抗CD25 sup/+抗体减少Treg减少肿瘤生长和转移（Olkhanud等人，2009）。相反，Treg的过继转移诱导免疫抑制并促进肿瘤生长（Smyth等人，2006; Janakiram等人，2015）。我们已经过继转移Treg以评价它们在体内的免疫抑制功能。我们的研究（Vences-Catalan等人，2015）比较了源自荷瘤野生型的Treg与CD81KO小鼠的免疫抑制功效。以下协议可以适用于任何其他来源的Tregs。
通过使用来自MACS Miltenyi Biotec的CD4 + CD25 +调节性T细胞分离试剂盒的两步程序分离和纯化淋巴结或脾肿瘤诱导的Treg。首先，通过阴性选择，然后CD25阳性选择+ T细胞富集CD4 + T细胞。然后将肿瘤诱导的纯化的Treg（CD3 + CD4 CD25 + FoxP3 + 与肿瘤细胞转化为幼稚小鼠（Winn测定）（Winn，1960）。根据研究需要，Treg也可以静脉内注射一次或几次。然后通过测径器或通过体内成像技术测量过继转移的Treg对肿瘤生长的影响。
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