| Phototaxis Assays of Synechocystis sp. PCC 6803 at Macroscopic and Microscopic Scales
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Author:
Date:
2017-06-05
[Abstract] Phototaxis is a mechanism that allows cyanobacteria to respond to fluctuations in the quality and quantity of illumination by moving either towards or away from a light source. Phototactic movement on low concentration agar or agarose plates can be analyzed at macroscopic and microscopic scales representing group behavior and single cell motility, respectively. Here, we describe a detailed procedure for phototaxis assays on both scales using the unicellular cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803.
[摘要] Phototaxis是允许蓝细菌通过朝向或远离光源移动来响应照明质量和数量的波动的机制。分别在低浓度琼脂或琼脂糖平板上的光镜移动可以分别表示组织行为和单细胞运动性的宏观和微观尺度。在这里，我们描述了使用单细胞蓝细菌集胞藻的两种鳞片上的光趋化测定的详细程序。 PCC 6803。
背景 模型生物 Synechocystis sp。 PCC 6803使用伸缩型IV皮脂（T4P）以潮汐表面移动，称为抽动动力。两个分泌的ATP酶（PilB和PilT）负责扩增和缩回菌毛装置，从而将细胞向前拉。集胞藻 sp。 PCC 6803拥有覆盖整个可见光谱的各种光感受器。光的吸收可以根据波长和强度刺激正或负光趋向性。最近，已经证明，单细胞集胞藻 PCC 6803能够通过将光聚焦在远侧的尖锐焦点上来直接检测单向照明（Schuergers等人，2016）。此外，显示抽动运动的方向与运动ATPase PilB的特定近端定位相关（Schuergers等人，2015）。提出了一种模型，即聚焦导致对运动装置的局部抑制，从而确定单个细胞作为远离焦点的光电响应的移动方向（Schuergers等人，2016） ）。
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| 35S pulse Labelling of Chlamydomonas Chloroplast Proteins
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Author:
Date:
2013-06-05
[Abstract] 35S pulse labelling of proteins is used to attach a radioactive label to newly synthesized proteins, as sulfur is an element that is mainly present in proteins (Fleischmann and Rochaix 1999). Depending on your organism’s uptake mechanisms you need cysteine, methionine or sulfuric acid as a source of radioactive sulfur. This example uses Chlamydomonas cells and H235SO4 (Schwarz et al., 2012).
[摘要] 由于硫是主要存在于蛋白质中的元素（Fleischmann和Rochaix 1999），因此蛋白质的 S脉冲标记用于将放射性标记附着到新合成的蛋白质上。 根据你的生物体的吸收机制，你需要半胱氨酸，甲硫氨酸或硫酸作为放射性硫的来源。 该实施例使用衣原体细胞和H 2 35 SO Schwarz等人 。，2012）。
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