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Ultra-Clear Tube

管,薄壁,超透明TM ,38.5mL,25×89mm(数量50)

Company: Beckman Coulter
Catalog#: 344058
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Biochemical Isolation of Myonuclei from Mouse Skeletal Muscle Tissue
Author:
Date:
2017-12-20
[Abstract]  Skeletal muscle provides the contractile force necessary for movement, swallowing, and breathing and, consequently, is necessary for survival. Skeletal muscle cells are unique in that they are extremely large cells containing thousands of nuclei. These nuclei must all work in concert to maintain skeletal muscle function and thereby maintain life. The nucleus is a major site of signaling integration and gene expression regulation. However, examining nuclear processes in skeletal muscle can be difficult because myonuclei are challenging to isolate. We optimized a protocol to purify myonuclei from whole muscle tissue using ultracentrifugation over a discontinuous sucrose gradient to separate the nuclear fraction. We used these purified nuclei for downstream applications including flow ... [摘要]  骨骼肌提供运动,吞咽和呼吸所需的收缩力,因此是生存所必需的。骨骼肌细胞是独特的,因为它们是含有数千个核的极大细胞。这些细胞核必须协调一致才能维持骨骼肌功能,从而维持生命。细胞核是信号整合和基因表达调控的主要部位。然而,检查骨骼肌中的核过程可能是困难的,因为肌核难以分离。我们优化了一个协议,从整个肌肉组织使用超速离心蔗糖梯度来分离核分数的纯化肌细胞。我们将这些纯化的细胞核用于下游应用,包括流式细胞术和质谱。我们使用这种方法来比较年轻和老鼠后肢肌肉的肌细胞蛋白质组(Cutler等人,2017)。这个协议可能适用于分离myonuclei的各种下游分析,如流式细胞仪,显微镜,蛋白质印迹和蛋白质组学。

【背景】为了生存,必须保持适当的骨骼肌功能。这种维持的一个组成部分是根据细胞需要和环境线索调整基因表达。调节基因表达的核过程是调节细胞组成和行为的关键组成部分。然而,由于四个技术限制,涉及这些过程的肌细胞蛋白难以研究。首先,骨骼肌是致密的,紧密地填满了组织中超过60%的蛋白质的收缩性蛋白质(Deshmukh等人,2015; Cutler等人)。 ...

Infection of Caenorhabditis elegans with Vesicular Stomatitis Virus via Microinjection
Author:
Date:
2017-11-20
[Abstract]  Over the past 15 years, the free-living nematode, Caenorhabditis elegans has become an important model system for exploring eukaryotic innate immunity to bacterial and fungal pathogens. More recently, infection models using either natural or non-natural nematode viruses have also been established in C. elegans. These models offer new opportunities to use the nematode to understand eukaryotic antiviral defense mechanisms. Here we report protocols for the infection of C. elegans with a non-natural viral pathogen, vesicular stomatitis virus (VSV) through microinjection. We also describe how recombinant VSV strains encoding fluorescent or luciferase reporter genes can be used in conjunction with simple fluorescence-, survival-, and luminescence-based assays to ... [摘要]  在过去的15年中,线虫自由生活已经成为探索真核细菌和真菌病原体真核免疫的重要模型系统。 最近,使用天然或非天然线虫病毒的感染模型也已经在C中建立。线虫。 这些模型提供了使用线虫了解真核抗病毒防御机制的新机会。 在这里,我们报告感染的协议。 线虫与非天然病毒病原体,水泡性口炎病毒(VSV)通过显微注射。 我们还描述了编码荧光或萤光素酶报告基因的重组VSV毒株如何与简单的基于荧光,存活和发光的分析结合使用来鉴定宿主遗传背景,并对病毒感染有不同的易感性。

【背景】由于它的遗传易用性,体积小,文化价廉,透明的身体,自由生活的线虫秀丽隐杆线虫作为模式生物提供了许多优点。此外,C的易感性。线虫对人类多种细菌和真菌病原体的作用使得这种蠕虫成为研究微生物发病机制的有吸引力的系统(Zhang和Hou,2013; Cohen and Troemel,2015)。最近,发现了正义ssRNA奥赛病毒(OV)作为第一种天然的病毒病原体。线虫已经提示使用OV- C。 elegans 模型来定义线虫抗病毒防御机制(Felix等人,2011; Gammon,2017)。这些研究已经证明了线虫抗病毒RNA干扰途径组分如Dicer相关解旋酶1(DRH-1)在限制病毒复制中的明确作用(Ashe等人,2013)。

为了补充OV模型系统,我们最近报道了新一代病毒的产生。使用反义ssRNA水泡性口炎病毒(VSV)(Gammon等人,2017)的线虫模型。用VSV感染野生型(N2)蠕虫是致命的,虽然抗病毒反应(例如突变体,drh-1突变体)突变体缺陷会更快地感染感染(Gammon ...

Glioma Induction by Intracerebral Retrovirus Injection
Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract]  Glioblastoma (GBM) is the most common primary brain cancer in adults and has a poor prognosis. It is characterized by a high degree of cellular infiltration that leads to tumor recurrence, atypical hyperplasia, necrosis, and angiogenesis. Despite aggressive treatment modalities, current therapies are ineffective for GBM. Mouse GBM models not only provide a better understanding in the mechanisms of gliomagenesis, but also facilitate the drug discovery for treating this deadly cancer. A retroviral vector system that expresses PDGFBB (Platelet-derived growth factor BB) and inactivates PTEN (Phosphatase and tensin homolog) and P53 tumor suppressors provides a rapid and efficient induction of glioma in mice with full penetrance. In this protocol, we describe a simple and practical method for ... [摘要]  成胶质细胞瘤(GBM)是成人中最常见的原发性脑癌,预后差。其特征在于高度的细胞浸润,导致肿瘤复发,非典型增生,坏死和血管生成。尽管采取积极的治疗方式,目前的疗法对GBM无效。小鼠GBM模型不仅提供了对胶质瘤发生机制的更好理解,而且有助于药物发现治疗这种致命的癌症。表达PDGFBB(血小板衍生生长因子BB)和灭活PTEN(磷酸酶和张力蛋白同源物)和P53肿瘤抑制因子的逆转录病毒载体系统提供了具有全面外显子的小鼠中胶质瘤的快速和有效的诱导。在该方案中,我们描述了一种简单实用的方法,用于在鼠脑中通过逆转录病毒注射诱导GBM形成。该系统对神经胶质瘤的诱导进行空间和时间控制,并允许用生物发光报告物评估治疗效果。
【背景】胶质母细胞瘤(GBM)是最具侵袭性的恶性脑肿瘤,不幸的是几乎总是致命的。尽管多种治疗方式有进展,但是尚未开发出治疗GBM的有效治疗方法。这种疾病的机制仍然知之甚少。动物模型一直是定义GBM发病机制和基因或药物治疗试验的非常重要的工具。已经开发了几种小鼠模型,其目的是产生尽可能接近模拟人类疾病的疾病,并表现出类似的分子,遗传和组织学特征。突出使用的模型是异种移植(Hingtgen等人,2008)模型,其中人类肿瘤细胞系可以在脑中原位移植以及在免疫受损的小鼠的皮下区域异位移植,提供了具有大肿瘤块在短时间内。遗传工程小鼠模型(GEMM)具有特异性增益的致癌活性或丧失肿瘤抑制通路,其类似于GBM中最频繁失调的通路中的扰动,导致啮齿类动物形成胶质瘤。 ...

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