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TWEEN® 20

TWEEN ® 20

Company: Sigma-Aldrich
Catalog#: P1379
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Studying the Role of Microglia in Neurodegeneration and Axonal Regeneration in the Murine Visual System
Author:
Date:
2018-08-20
[Abstract]  Microglia reside in the central nervous system (CNS) and are involved in the maintenance of the physiologic state. They constantly survey their environment for pathologic alterations associated with injury or diseases. For decades, researchers have investigated the role of microglia under different pathologic conditions, using approaches aiming to inhibit or eliminate these phagocytic cells. However, until recently, methods have failed to achieve complete depletion. Moreover, treatments often affected other cells, making unequivocal conclusions from these studies difficult. Recently, we have shown that inhibition of colony stimulating factor 1 receptor (CSF1R) by oral treatment with PLX5622 containing chow enables complete depletion of retinal microglia and almost complete microglia ... [摘要]  小胶质细胞存在于中枢神经系统(CNS)中,并参与维持生理状态。他们不断调查他们的环境,以寻找与受伤或疾病相关的病理改变。几十年来,研究人员使用旨在抑制或消除这些吞噬细胞的方法,研究了小胶质细胞在不同病理条件下的作用。然而,直到最近,方法未能实现完全耗尽。此外,治疗通常会影响其他细胞,因此难以从这些研究中得出明确的结论。最近,我们已经表明,通过用含有食物的PLX5622口服治疗抑制集落刺激因子1受体(CSF1R)能够完全消除视网膜小胶质细胞并且几乎完全消除视神经中的小胶质细胞,而不影响外周巨噬细胞或其他细胞。使用这种方法,我们研究了小胶质细胞在视网膜神经保护中的作用以及在不同条件下受损视神经中的轴突再生。因此,这里提出的这种有效,可靠和易于使用的方案将使研究人员能够明确地研究小胶质细胞对神经变性和轴突再生的贡献。该方案还可以容易地扩展到视觉系统中的急性和慢性损伤或疾病的其他范例。

【背景】 小胶质细胞是中枢神经系统(CNS)的常驻免疫细胞,其持续扫描其环境以进行病理改变(Nimmerjahn et al。,2005)。在检测到这种情况后,小胶质细胞转变为活化状态并向其进行不同任务的来源迁移(Kreutzberg,1996; Davalos et ...

In vitro Enzymatic Assays of Histone Decrotonylation on Recombinant Histones
Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract]  Class I histone deacetylases (HDACs) are efficient histone decrotonylases, broadening the enzymatic spectrum of these important (epi-)genome regulators and drug targets. Here, we describe an in vitro approach to assaying class I HDACs with different acyl-histone substrates, including crotonylated histones and expand this to examine the effect of inhibitors and estimate kinetic constants. [摘要]  I类组蛋白去乙酰化酶(HDACs)是有效的组蛋白去蛋白酶,拓宽了这些重要(epi-)基因组调节因子和药物靶标的酶谱。 在这里,我们描述了一种体外方法来测定具有不同酰基 - 组蛋白底物的I类HDAC,包括巴豆酰化组蛋白,并将其扩展以检查抑制剂的作用并估计动力学常数。

【背景】组蛋白的翻译后修饰是基因组调控的重要方面,包括基因表达(例如参见Pengelly et al。,2013;在Castillo 等人中综述,2017)。组蛋白修饰改变染色质结构和/或调节蛋白质的结合,例如核小体重塑因子(在Bannister和Kouzarides,2011中综述)。大多数组蛋白修饰是可逆的并且可以酶促去除。例如,通过组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)除去组蛋白乙酰化,其中存在几类。近年来,新的组蛋白赖氨酸酰化,包括琥珀酰化,丙酰化,丁酰化,羟基丁基化和巴豆酰化已成为规范组蛋白乙酰化的新替代物,并且已经证实了许多这些新发现的组蛋白修饰的功能相关性(Sabari 等人,2017)。特别是,组蛋白巴豆酰化与活性基因表达有关,并被认为受细胞代谢状态的影响(Sabari et al。,2015; Fellows et al。 ,2018年)。最近已显示I类组蛋白脱乙酰酶也有效地去除组蛋白质(Wei et al。,2017; Fellows et al。,2018)。
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A Lentiviral Pseudotype ELLA for the Measurement of Antibodies Against Influenza Neuraminidase
Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract]  This protocol describes the rapid and safe production of lentiviral pseudotypes characterized by a lentiviral core containing a reporter, in conjunction with avian influenza haemagglutinin (HA) and human neuraminidase (NA) glycoproteins on the surface. Production is optimized with Endofectin LentiTM transfection reagent in 6-well plate format. These pseudotyped viruses can be employed for serological assays of surface glycoproteins HA and NA. They can be efficiently used to perform the ELLA (Enzyme-linked lectin assay) to measure NA inhibiting antibodies in lieu of using reassortant virus or Triton X-100 inactivated wild-type virus as source of antigen, which may require higher biosafety levels. [摘要]  该方案描述了慢病毒假型的快速和安全生产,其特征在于含有报道分子的慢病毒核心,以及表面上的禽流感血凝素(HA)和人神经氨酸酶(NA)糖蛋白。 使用6孔板形式的Endofectin Lenti TM 转染试剂优化生产。 这些假型病毒可用于表面糖蛋白HA和NA的血清学测定。 它们可以有效地用于进行ELLA(酶联凝集素测定)以测量NA抑制抗体,而不是使用重配病毒或Triton X-100灭活的野生型病毒作为抗原来源,这可能需要更高的生物安全水平。

【背景】流感病毒假型的产生先前已被广泛描述(Nefkens et al。,2007; Temperton et al。,2007; Carnell et al。,2015)。需要一种安全快速的系统来评估通过ELLA测定靶向NA的抗体,避免使用重配错配病毒或野生型病毒,这已经通过产生携带NA型流感假型来满足(Prevato et al。,2015)。最近的一项研究(Biuso et al。,2017)证实HA与NA的共表达改善了新形成的假型慢病毒的释放。在这里,我们报告了一种简单,广泛适用和优化的PV生产方案,使用6孔板格式的Endofectin Lenti TM ...

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