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Glycerol

甘油

Company: Sigma-Aldrich
Catalog#: G5516
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Purification of Soluble Recombinant Human Tau Protein from Bacteria Using Double-tag Affinity Purification
Author:
Date:
2018-11-20
[Abstract]  Dysfunction of the microtubule-associated protein Tau (encoded by the MAPT gene) has been implicated in more than twenty neurodegenerative diseases, including Alzheimer’s. As such, the physiological and disease-relevant functions of Tau have garnered great interest in the research community. One barrier hampering investigations into the functions of Tau and the generation of pharmacological agents targeting Tau has been the difficulty of obtaining soluble Tau protein in purified form. Here, we describe a protocol that uses dual affinity tag purification to selectively purify soluble recombinant Tau protein from bacteria that is functionally active for downstream applications including immunization, microtubule binding assays, and protein-protein interaction studies. [摘要]  微管相关蛋白Tau(由 MAPT 基因编码)的功能障碍已经涉及20多种神经退行性疾病,包括阿尔茨海默病。 因此,Tau的生理和疾病相关功能引起了研究界的极大兴趣。 妨碍对Tau功能的研究和产生靶向Tau的药理学试剂的一个障碍是难以获得纯化形式的可溶性Tau蛋白。 在这里,我们描述了一种方案,该方案使用双亲和标签纯化从细菌中选择性纯化可溶性重组Tau蛋白,所述细菌对于下游应用具有功能活性,包括免疫,微管结合测定和蛋白质 - 蛋白质相互作用研究。
【背景】Tau传统上被定义为微管结合蛋白;然而,在人类疾病中,Tau可以与轴突微管分离并错误定位到其他神经元区室,包括体细胞,树突和突触,其中与非微管蛋白和结构的相互作用驱动神经元功能障碍(Iqbal et al。 ,2016; Wang和Mandelkow,2016; Zhou et al。,2017; McInnes et al。,2018)。尽管神经原纤维缠结形式的Tau聚集体通常存在于死后患病的脑组织中,但研究表明,可溶性Tau,而不是聚集的Tau,是神经元功能障碍的主要原因(Crimins et al。,2012 ; Polydoro et al。,2014; Koss et al。,2016)。因此,研究Tau在疾病中的可溶性功能,例如鉴定蛋白质 - ...

Nuclear/Cytoplasmic Fractionation of Proteins from Caenorhabditis elegans
Author:
Date:
2018-10-20
[Abstract]  C. elegans is widely used to investigate biological processes related to health and disease. To study protein localization, fluorescently-tagged proteins can be used in vivo or immunohistochemistry can be performed in whole worms. Here, we describe a technique to localize a protein of interest at a subcellular level in C. elegans lysates, which can give insight into the location, function and/or toxicity of proteins. [摘要]  ℃。 线虫>广泛用于研究与健康和疾病相关的生物过程。 为了研究蛋白质定位,荧光标记的蛋白质可用于体内>或免疫组织化学可在整个蠕虫中进行。 在这里,我们描述了一种在 C中亚细胞水平定位感兴趣的蛋白质的技术。 线虫>裂解物,可以洞察蛋白质的位置,功能和/或毒性。
【背景】亚细胞分级已用于不同的模式生物中以鉴定和研究细胞核,细胞膜和细胞质中的蛋白质功能。 例如,当聚集倾向蛋白定位于细胞核或细胞质中时,它们的毒性可能更大(Kontopoulos et al。>,2006; Barmada et al。>,2010)。 在这里,我们提供了一个协议(改编自Chen et al。>,2000和La Rocca et al。>,2007)来定位的细胞核和细胞质组分中的特定蛋白质。>℃。线虫>。

Rice Ragged Stunt Virus Propagation and Infection on Rice Plants
Author:
Date:
2018-10-20
[Abstract]  Virus inoculation is a basic experimental procedure to evaluate the resistance of a rice variety or a transgenic material upon virus infection. We recently demonstrated that Rice Ragged Stunt Virus (RRSV), an oryzavirus that is transmitted by brown planthopper (BPH), can suppress jasmonic acid-mediated antiviral defense through the induction of microRNA319 and facilitate virus infection in rice. To verify this, we performed virus inoculation experiments on wild-type rice plants and miR319-TCP21-associated transgenic rice plants through a modified group inoculation method. Here, we presented the detailed procedure of RRSV propagation and infection process on rice plants. [摘要]  病毒接种是评估水稻品种或转基因材料对病毒感染的抗性的基本实验程序。 我们最近证明,由褐飞虱(BPH)传播的 Rice Ragged Stunt Virus >(RRSV)是一种 oryzavirus >,可以通过诱导抑制茉莉酸介导的抗病毒防御 microRNA319并促进水稻中的病毒感染。 为了验证这一点,我们通过改良的组接种方法对野生型水稻植物和miR319-TCP21相关的转基因水稻植物进行了病毒接种实验。 在这里,我们介绍了水稻植物RRSV繁殖和感染过程的详细程序。
【背景】研究病毒发病机制和筛选抗病毒水稻品种已经在克服水稻病毒病和保持粮食安全方面做了大量工作。 在该领域中,病毒接种是评估转基因材料或水稻品种的抗性的必要且可靠的方法。 水稻粗糙特技病毒>(RRSV)可以在许多亚洲国家以持续繁殖的方式通过褐飞虱传播水稻褴褛特技病(Ling et al。>,1978; Hibino,1979)。 两种经典方法,包括单苗接种和组接种,已用于进行病毒接种实验(Zhang et al。>,2013)。 通过修改传统的群体接种方法,我们提供了一种与自然感染条件非常相似的便捷方法。

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