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Date:
2016-10-20
[Abstract] This protocol describes two biological assays to evaluate pathogenicity of Burkholderia cepacia complex (Bcc) strains against the nematode Caenorhabditis elegans. Specifically, these two assays allow one to identify if the under-investigated Bcc strains are able to kill the nematodes by intestinal colonization (slow killing assay, SKA) or by toxins production (fast killing assay, FKA). The principal differences between the two assays rely on the different killing kinetics for worms.
[摘要] 该协议描述了评价洋葱伯克霍尔德菌（Burkholderia cepacia）复合物（Bcc）菌株对线虫秀丽隐杆线虫的致病性的两种生物学测定。具体地，这两个测定允许人们通过肠道定殖（慢速杀灭测定，SKA）或通过毒素生产（快速杀灭测定，FKA）来鉴定未研究的Bcc菌株是否能够杀死线虫。两种测定法之间的主要差异依赖于对蠕虫的不同杀死动力学。
[背景] Burkholderia cepacia 复合体（Bcc）在革兰氏阴性多药耐药细菌中占据关键位置。它由至少20种密切相关的物种组成。许多Bcc株是多药物和抗药性的机会性人类病原体在免疫受损的个体（包括囊性纤维化（CF））患者中引起有问题的肺部感染。使用非脊椎动物宿主模型可以用于解剖毒性和致病性决定因素以及鉴定新的治疗靶点（Kothe等人，2003）。
存在用于检测液体或固体表面中针对大组宿主模型的Bcc毒力的很多测定。然而，其中一些主要集中在表型观察，其难以检测并具有低重现性（Cardona等人，2005）。在这里，我们开发了基于对存活蠕虫的分析的两种测定，其是更可重复的，并允许在测试的Bcc菌株之间容易和快速的比较。此外，这些测定允许检测Bcc对线虫的死亡机制。
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