| Fatty Acid Content and Composition of Triacylglycerols of Chlorella kessleri
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Author:
Date:
2018-01-05
[Abstract] Triacylglycerols (TAGs) are esters formed from one glycerol and three fatty acids. TAGs are induced to accumulate in algal cells under environmental stress conditions including nutrient-limitation, hyperosmosis, and low temperature, for the storage of metabolic energy and carbon, and also for the consumption of excess energy (e.g., Hirai et al., 2016; Hayashi et al., 2017). Beside their physiological significance, the commercial utilization of algal TAG has been expected for the production of biodiesel, the methyl esters of fatty acids, from the aspect of carbon-neutral conception. The amounts of TAGs can be determined through quantitative measurement of their constituent fatty acids. This protocol consists of the following three parts: the first is the ...
[摘要] 三酰甘油（TAG）是由一种甘油和三种脂肪酸形成的酯。在包括营养限制，高渗和低温在内的环境胁迫条件下，TAG被诱导积累在藻细胞中，用于代谢能和碳的储存以及多余能量的消耗（例如， Hirai等人，2016; Hayashi等人，2017）。除了它们的生理意义之外，从碳中性概念的角度来看，藻类TAG的商业利用已经被期望用于生产生物柴油，即脂肪酸的甲酯。 TAG的量可以通过定量测定其构成脂肪酸来确定。该方案由以下三部分组成：首先是根据Bligh和Dyer（1959）的方法，使用有机溶剂，氯仿和甲醇从藻细胞中提取总脂质，其次是TAG的分离通过薄层色谱法（TLC）从其他脂质类别中分离出来，第三种是产生其组成型脂肪酸的甲基酯化衍生物，随后通过毛细管气相色谱法（GLC）对其进行定量。该协议改编自Sato和Tsuzuki（2011），用于绿藻的TAG分析， Chlorella kessleri 。
【背景】已经使用几种方法测定TAG的脂肪酸含量。简单而方便的方案包括用脂肪酶处理将TAG转化成甘油，随后通过酶产生与产生颜色或荧光的探针反应的产物测量甘油含量（McGowan等人，1983; ...
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| Quantitation of Cytochromes b559, b6, and f, and the Core Component of Photosystem I P700 in Cyanobacterial Cells
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2016-11-05
[Abstract] Cytochrome (Cyt) b559, an important and essential core component of photosystem II in the photosynthetic electron transport system, is a heme-bridged heterodimer protein composed of an alpha subunit (PsbE) and a beta subunit (PsbE), and its reduced form has an absorption maximum in the α-band at 559 nm. The amounts of Cyt b559 can be determined by spectrophotometrical measurement of reduced minus oxidized difference spectra that are normalized with absorbance of isosbestic point at 580 nm. The authors use differential extinction coefficients of Cyt b559 [Δε(559-580 nm) = 15.5 mM-1·cm-1], which have been reported by Garewal and Wasserman (1974). In addition to the Cyt b559, this ...
[摘要] dA 6m DNA免疫沉淀随后深度测序（DIP-Seq）是鉴定和研究N 6 - 甲基脱氧腺苷（dA 6）的全基因组分布的关键工具， 6m ）。这种新的DNA修饰的精确功能仍然需要完全阐明，但是已知转录起始位点不存在并且从外显子中排除，表明在转录调节中的作用（Koziol等人，2015 ）。重要的是，其存在表明DNA可能比先前认为的更多样化，因为进一步的DNA修饰可能存在于真核DNA中（Koziol等人，2015）。该方案描述了进行dA 6m DNA免疫沉淀（DIP）的方法，其用于表征高等真核生物中的第一dA 6m甲基化酶分析（Koziol等人。，2015）。在该协议中，我们描述了如何基因组DNA被分离，片段化，然后用识别基因组DNA中的dA 6m 的抗体拉下含有dA 6m 的DNA。在随后的洗涤之后，消除不含dA 6m的DNA片段，并且从抗体洗脱含有dA 6m的片段，以便进一步处理用于随后的分析。
[背景] 此协议是为了识别基因组中包含dA 6m 的区域而开发的。它可以用于检测不同基因组中的dA 6m 。作为指导，本方案从用于检测RNA中腺苷甲基化的现有方法建立（Dominissini等人，2013）。我们开发这个协议，并适应它的dA 6 m 在DNA中的检测，而不是检测腺苷甲基化RNA。这是必需的，因为当时没有方案可用于允许在真核DNA中dA ...
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| Isolation and Culture of Neurospheres for the Study of Pathogenesis of Prion Disease
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Author:
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2014-03-20
[Abstract] Neurosphere contains neural stem cells that are capable of self-renewal and multilineage differentiation including neurons, astrocytes, and oligodendrocytes (Gage, 2000). Cell culture model using differentiated neurosphere cultures are suggested to be a valuable tool for studying the pathogenesis of prion disease at the cellular level (Iwamaru et al., 2013). This protocol describes the procedure for a culture of whole brain-derived neurospheres from newborn mouse brains. Neurosphere formation steadily occurs within a week from the cultures of neonatal whole brains and these cells have stem cell properties.
[摘要] 神经球包含能够自我更新和多向分化的神经干细胞，包括神经元，星形胶质细胞和少突胶质细胞（Gage，2000）。 使用分化的神经球培养物的细胞培养模型被认为是用于研究朊病毒疾病在细胞水平的发病机制的有价值的工具（Iwamaru等人，2013）。 该协议描述了来自新生小鼠脑的全脑衍生的神经球的培养的程序。 神经球形成稳定地发生在新生儿全脑的培养物的一周内，并且这些细胞具有干细胞特性。
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