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Vero

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Company: ATCC
Catalog#: CCL-81
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Virucidal and Neutralizing Activity Tests for Antiviral Substances and Antibodies
Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract]  In a narrow definition, virucidal activity represents the activity by which to interact with and physically disrupt viral particles. In a broad definition, it includes the activity by which to functionally inhibit (neutralize) viral infectivity without apparent morphological alterations of the viral particles. The viral infectivity can be measured in cell culture system by means of plaque assay, infectious focus assay, 50% tissue culture infectious dose (TCID50) assay, etc. Morphologically, disruption of viral particles can be demonstrated by negative staining electron microscopic analysis of viral particles. In this article, we describe methods to assess virucidal activity in a broad definition. [摘要]  在狭义定义中,杀病毒活性表示与病毒颗粒相互作用和物理破坏的活性。 在一个广义的定义中,它包括了功能上抑制(中和)病毒感染性而没有病毒颗粒的明显形态改变的活性。 可以通过噬菌斑测定,感染性聚焦测定,50%组织培养感染剂量(TCID 50)测定,等等在细胞培养系统中测量病毒感染性。 形态学上,病毒颗粒的破坏可以通过病毒颗粒的负染色电子显微镜分析来证明。 在这篇文章中,我们描述了用广义定义评估杀病毒活性的方法。

【背景】病毒是细胞内寄生虫,它们劫持宿主细胞机制来复制它们自己的基因组。在病毒生命周期的最初阶段,感染性病毒颗粒附着(结合)到靶细胞表面上的称为病毒受体的特定宿主蛋白,然后病毒渗透(内化和/或融合)到细胞的细胞内区室宿主细胞,其中病毒生命周期的后续步骤继续产生后代病毒体(Scheel和Rice,2013)。

狭义定义中的杀病毒活性表示与病毒颗粒相互作用和物理破坏的活性。在一个广义的定义中,它包括与病毒感染性相互作用并在功能上抑制(中和)病毒感染性而没有病毒颗粒的明显形态改变的活性,如抗体介导的中和的情况。

最近我们报道了从蛇毒(Chen等,2017)获得的分泌型磷脂酶Aβ的异构体和来自蝎毒(El-Bitar ...

Lentiviral Knockdown of Transcription Factor STAT1 in Peromyscus leucopus to Assess Its Role in the Restriction of Tick-borne Flaviviruses
Author:
Date:
2017-12-05
[Abstract]  Cellular infection with tick-borne flaviviruses (TBFVs) results in activation of the interferon (IFN) signaling pathway and subsequent upregulation of numerous genes termed IFN stimulated genes (ISGs) (Schoggins et al., 2011). Many ISGs function to prevent virus pathogenesis by acting in a broad or specific manner through protein-protein interactions (Duggal and Emerman, 2012). The potency of the IFN signaling response determines the outcome of TBFV infection (Best, 2016; Carletti et al., 2017). Interestingly, data from our lab show that TBFV replication is significantly restricted in cells of the reservoir species Peromyscus leucopus thereby suggesting a potent antiviral response (Izuogu et al., 2017). We assessed the relative contribution of IFN ... [摘要]  蜱传黄热病病毒(TBFV)的细胞感染导致干扰素(IFN)信号传导途径的激活和随后称为IFN刺激基因(ISG)(Schoggins等人,2011)的众多基因的上调。许多ISG通过蛋白质 - 蛋白质相互作用以广泛或特定的方式起作用来防止病毒发病(Duggal和Emerman,2012)。 IFN信号反应的效力决定了TBFV感染的结果(Best,2016; Carletti等人,2017)。有趣的是,我们实验室的数据显示TBFV复制在储库物种Peromyscus leucopus的细胞中显着受到限制,从而表明有效的抗病毒应答(Izuogu等人,2017)。我们评估干扰素信号对抗性的相对贡献。通过敲低IFN反应途径中的主要转录因子来抑制白血病。信号转导和转录激活因子1(STAT1)是专门针对在P。 leucopus细胞通过shRNA技术。我们进一步测试了基因敲低对细胞对IFN反应和限制病毒复制的能力的影响;结果表明当STAT1表达被改变时,leucopus细胞对IFN刺激的反应降低,并且对TBFV复制显着更敏感。

【背景】IFN信号是抵抗侵入宿主细胞的黄病毒的第一道防线(Robertson等人,2009; Lazear和Diamond,2015)。通过模式识别受体(PRR)检测与病毒颗粒相关的分子标记,然后通过转录因子引发下游信号从细胞释放1型IFN(Kawai ...

Infection of Caenorhabditis elegans with Vesicular Stomatitis Virus via Microinjection
Author:
Date:
2017-11-20
[Abstract]  Over the past 15 years, the free-living nematode, Caenorhabditis elegans has become an important model system for exploring eukaryotic innate immunity to bacterial and fungal pathogens. More recently, infection models using either natural or non-natural nematode viruses have also been established in C. elegans. These models offer new opportunities to use the nematode to understand eukaryotic antiviral defense mechanisms. Here we report protocols for the infection of C. elegans with a non-natural viral pathogen, vesicular stomatitis virus (VSV) through microinjection. We also describe how recombinant VSV strains encoding fluorescent or luciferase reporter genes can be used in conjunction with simple fluorescence-, survival-, and luminescence-based assays to ... [摘要]  在过去的15年中,线虫自由生活已经成为探索真核细菌和真菌病原体真核免疫的重要模型系统。 最近,使用天然或非天然线虫病毒的感染模型也已经在C中建立。线虫。 这些模型提供了使用线虫了解真核抗病毒防御机制的新机会。 在这里,我们报告感染的协议。 线虫与非天然病毒病原体,水泡性口炎病毒(VSV)通过显微注射。 我们还描述了编码荧光或萤光素酶报告基因的重组VSV毒株如何与简单的基于荧光,存活和发光的分析结合使用来鉴定宿主遗传背景,并对病毒感染有不同的易感性。

【背景】由于它的遗传易用性,体积小,文化价廉,透明的身体,自由生活的线虫秀丽隐杆线虫作为模式生物提供了许多优点。此外,C的易感性。线虫对人类多种细菌和真菌病原体的作用使得这种蠕虫成为研究微生物发病机制的有吸引力的系统(Zhang和Hou,2013; Cohen and Troemel,2015)。最近,发现了正义ssRNA奥赛病毒(OV)作为第一种天然的病毒病原体。线虫已经提示使用OV- C。 elegans 模型来定义线虫抗病毒防御机制(Felix等人,2011; Gammon,2017)。这些研究已经证明了线虫抗病毒RNA干扰途径组分如Dicer相关解旋酶1(DRH-1)在限制病毒复制中的明确作用(Ashe等人,2013)。

为了补充OV模型系统,我们最近报道了新一代病毒的产生。使用反义ssRNA水泡性口炎病毒(VSV)(Gammon等人,2017)的线虫模型。用VSV感染野生型(N2)蠕虫是致命的,虽然抗病毒反应(例如突变体,drh-1突变体)突变体缺陷会更快地感染感染(Gammon ...

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