| Isolation of Murine Primary Aortic Smooth Muscle Cells
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Author:
Date:
2021-02-05
[Abstract] Vascular smooth muscle cells (VSMCs) have been cultured for decades to study the role of these cells in cardiovascular disorders. The most common source of VSMCs is the rat aorta. Here we show the adaptation of this method to isolate and culture mouse aortic VSMCs. The advantage of this method is that there are many more transgenic mouse lines available compared to rats. The protocol consists of the isolation of the aorta, the liberation of vascular cells by the action of collagenase, culturing of VSCMs, and analyzing filamentous actin and alpha smooth muscle actin by fluorescence microscopy. VSCMs can be further used to study mechanisms underlying cardiovascular diseases.
Graphic abstract
Figure 1. Working steps ...
[摘要] [摘要]血管平滑肌细胞（VSMC）已培养了数十年，以研究这些细胞在心血管疾病中的作用。VSMC的最常见来源是大鼠主动脉。在这里，我们展示了此方法对分离和培养小鼠主动脉VSMC的适应性。这种方法的优点是，与大鼠相比，有更多的转基因小鼠系可用。该方案包括主动脉的分离，通过胶原酶的作用释放血管细胞，培养VSCM ，通过荧光显微镜分析丝状肌动蛋白和α平滑肌肌动蛋白。VSCM可进一步用于研究心血管疾病的潜在机制。
图形摘要：
˚F igure 1.工作步骤
关键词：血管平滑肌细胞鼠主动脉提取分离培养
[背景]血管壁细胞（壁细胞）在多种疾病的调节中起着至关重要的作用，从高血压（Rodríguez-Vita等，2005a）和动脉粥样硬化（Rodríguez-Vita等，2008）到癌症（ Wong等人，2020年），甚至最近还有COVID-19 （He等人，2020年）。毛细血管大部分被周细胞覆盖，而较大的血管在血管壁中含有VSCM。壁细胞通过血管收缩和血管舒张来控制血流。这样，吨哎是在几种药物靶，其降低血压（圣保罗等人，2020） ...
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| Human Endometrial Stem Cell Isolation from Endometrium and Menstrual Blood
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Author:
Date:
2018-01-20
[Abstract] Human endometrial stem cell/stromal cells (hEnSCs) are isolated from endometrium or menstrual blood and are recognized as a valuable cell type in tissue engineering and cell therapy. Furthermore, hEnSCs, which have CD90 (a mesenchymal marker), CD105 (endoglin), CD44, CD146 (endometrial stem cell markers) and lack CD31 (Endothelial marker), CD34 (hematopoietic marker) and CD133 on the cell surface, are a new source of mesenchymal stem/stromal cells. Additionally, these cells can be encapsulated into self-assembling peptide nanofibers as a 3D scaffold for applications in the treatment of neurodegenerative diseases. Here, we describe a protocol to isolate hEnSCs from endometrium or menstrual blood.
[摘要] 人类子宫内膜干细胞/基质细胞（hEnSCs）是从子宫内膜或经血中分离出来的，在组织工程和细胞治疗中被公认为有价值的细胞类型。 此外，在细胞表面具有CD90（间充质标记），CD105（内皮糖蛋白），CD44，CD146（子宫内膜干细胞标记）和缺乏CD31（内皮标记），CD34（造血标记）和CD133的hEnSCs是新的 间充质干细胞/基质细胞的来源。 此外，这些细胞可以封装成自组装肽纳米纤维作为三维支架应用于治疗神经退行性疾病。 在这里，我们描述了从子宫内膜或经血中分离hEnSC的方案。
【背景】正在研究细胞替代治疗，作为治疗神经退行性疾病（如阿尔茨海默病，中风和脊髓损伤）的新策略（Tavakol等人，2014b; 2015; 2016a和2016c）。子宫内膜干细胞/基质细胞（hEnSCs）可以从经血（Azedi等人，2014和2017）和子宫内膜分离。这些细胞具有脂肪形成（Khanmohammadi等人，2014），成骨（Darzi等人，2012）和软骨形成（Kazemnejad等人， >，2012）分化潜力。此外，这些细胞可以与支架组合用作组织工程应用中智能细胞支架的成分（Tavakol等人，2014a; 2016b和2017）。值得注意的是，诸如外来体，微泡和其他组分的细胞区室被认为比使用全细胞的治疗更安全。 ...
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| Isolation and Expansion of Mesenchymal Stem Cells from Murine Adipose Tissue
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Author:
Date:
2017-08-20
[Abstract] Mesenchymal stem cells (MSCs) are currently intensively studied due to significant promise which they represent for successful implementations of future cell therapy clinical protocols. This in turn emphasizes importance of careful preclinical studies of MSC effects in various murine disease models. The appropriate cell preparations with reproducible biological properties are important to minimize variability of results of experimental cell therapies. We describe here a simple protocol for isolation of murine MSCs from adipose tissues and their reproducible multi-log expansion under hypoxia conditions.
[摘要] 间充质干细胞（MSC）目前正在深入研究，因为它们代表未来细胞治疗临床方案的成功实施的重大前景。 这又强调了对各种鼠疾病模型中MSC效应的仔细临床前研究的重要性。 具有可重现的生物学性质的合适的细胞制剂对于最小化实验细胞疗法结果的变异性是重要的。 我们在这里描述了一种用于从脂肪组织中分离鼠MSC的简单方案及其在缺氧条件下的可重复的多对数扩增。
【背景】最初由Friedenstein鉴定的MSC是成纤维细胞样形态的骨髓细胞，粘附于塑料和高自我更新能力，导致体外成纤维细胞样集落的形成（Friedenstein等，1976; Review in Phinney andSensebé ，2013）。 MSCs由于其在医学上的潜在应用，目前是研究最成熟的成体祖细胞类型之一。这些细胞可以从各种器官中分离（Murray等，2014），并且被认为是源于血管，以周细胞或血管壁细胞。除了能够沿着成骨，脂肪形成和软骨形成谱系分化的能力之外，MSC具有免疫调节特性，并且被认为参与对组织损伤的反应，以及通过其影响巨噬细胞极化的能力来组织抗炎反应（Prockop，2013; Caplan，2016）。
鉴于这些特性，MSCs代表了未来相关细胞治疗临床方案的成功实施的巨大前景。这反过来强调了在各种鼠疾病模型中使用MSC进行仔细临床前研究的重要性。制备大量具有可重复生物学特性的合适细胞样品的能力对于在开发基于MSC的实验细胞疗法期间最小化结果的变异性至关重要。然而，与具有强抗氧化防御性并因此在大气氧条件下相当好的人类MSC不同，小鼠MSC对氧应激更敏感，并且在常规CO2培养箱中培养时具有有限的寿命和扩张能力。相反，在缺氧条件下培养这些细胞，相反，显着延长了它们的寿命，并允许多对数扩增，提供足够量的具有可重复性质的细胞材料，用于用鼠实验疾病模型重复实验（Boregowda等，2012; ...
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